[发明专利]使用必需基因作为标记并任选地将其再循环的细胞修饰方法有效
申请号: | 201380048215.4 | 申请日: | 2013-09-19 |
公开(公告)号: | CN104640990B | 公开(公告)日: | 2017-12-26 |
发明(设计)人: | 艾瑟·兰格·德;伯纳德·迈瑞克;约翰尼斯·安德列什·劳博斯;黄秀伦 | 申请(专利权)人: | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 |
主分类号: | C12N15/65 | 分类号: | C12N15/65;C12N15/80 |
代理公司: | 北京东方亿思知识产权代理有限责任公司11258 | 代理人: | 肖善强 |
地址: | 荷兰*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明涉及在靶位点修饰宿主细胞的方法,所述方法包括提供宿主细胞,所述宿主细胞在第一位点包含至少两个位点特异性重组位点和具有必需功能或编码具有必需功能的产物的核酸;在所述靶位点向所述宿主细胞中引入具有所述必需功能或编码具有所述必需功能的产物的另一核酸;和通过所述至少两个位点特异性重组位点在所述第一位点实施重组,以使所述具有必需功能或编码具有必需功能的产物的核酸无功能,从而在所述靶位点修饰所述宿主细胞。本发明还涉及通过本发明的方法能够得到的细胞。 | ||
搜索关键词: | 使用 必需 基因 作为 标记 任选 再循环 细胞 修饰 方法 | ||
【主权项】:
在靶位点修饰宿主细胞的方法,所述方法包括:通过用其侧翼是至少两个位点特异性重组位点的具有必需功能或编码具有必需功能的产物的核酸的拷贝替换宿主细胞中具有必需功能或编码具有必需功能的产物的内源核酸的步骤提供宿主细胞,所述宿主细胞在第一位点包含至少两个位点特异性重组位点和具有必需功能或编码具有必需功能的产物的核酸,其中在所述第一位点,至少两个所述位点特异性重组位点位于具有必需功能或编码具有必需功能的产物的所述核酸的侧翼;在靶位点向所述宿主细胞中引入具有所述必需功能或编码具有所述必需功能的产物的另一核酸;以及通过所述至少两个位点特异性重组位点在所述第一位点实施重组,以使所述第一位点处具有必需功能或编码具有必需功能的产物的所述核酸无功能,其中目的核酸被引入到靶位点,从而在所述靶位点修饰所述宿主细胞。
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