[发明专利]E.coli O157:H7鞭毛蛋白H7抗原片段的表达、纯化及应用

摘要

本发明E.coliO157:H7鞭毛蛋白H7抗原片段的表达、纯化及应用涉及基因工程技术、疫苗和诊断试剂领域。本发明是通过计算机分析，筛选出E.coliO157：H7Flic蛋白内的强抗原表位，第215个氨基酸至第345个氨基酸，共131个氨基酸，选择原核生物偏爱的密码子，化学合成抗原表位的全新基因序列，利用基因工程技术，表达该基因片段、制备E.coliO157：H7Flic蛋白强抗原表位片段。表达的蛋白可用于E.coliO157：H7感染抗体的检测及单抗和多抗的制备。

主权项

一种化学合成的E. coli O157: H7鞭毛蛋白H7抗原片段，该抗原片段编码含强抗原表位E. coli O157: H7 Flic蛋白胞外区基因片段，即第215个氨基酸至第345个 氨基酸，共131个氨基酸，在该基因片段的5'端增加了BamHI酶切位点（下划线部分），在3'端增加了终止密码子TAA和EcoRI酶切位点（下划线部分），化学合成的基因序列全长408 bp，序列如下：GGATCC ACT ACT GAT GCT GCA TTT GAT AAA TTA GGT AAT GGC GAT AAA GTT ACA GTT GGC GGC GTA GAT TAT ACT TAT AAT GCT AAA TCT GGT GAT TTT ACT ACT ACT AAA TCT ACT GCT GGT ACT GGT GTT GAT GCA GCA GCA CAA GCT GCT GAT TCA GCT TCA AAA CGT GAT GCG TTA GCT GCA ACT CTT CAT GCT GAT GTT GGT AAA TCT GTT AAT GGT TCT TAT ACT ACA AAA GAT GGT ACT GTT TCT TTT GAA ACT GAT TCA GCA GGT AAT ATT ACT ATT GGT GGA AGT CAA GCA TAT GTA GAT GAT GCA GGT AAT TTA ACT ACT AAT AAT GCT GGT AGT GCA GCT AAA GCT GAT ATG AAA GCA CTG CTC AAA GCA GCA AGT GAA GGT AGT GAT TAA CTCGAG 。