[发明专利]表达人血清白蛋白的靶向载体及其构建方法有效
| 申请号： | 201310704929.8 | 申请日： | 2013-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN104726490B | 公开（公告）日： | 2018-05-04 |
| 发明（设计）人： | 王向东;高鹏;魏光伟;李相芝 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;A01K67/027;C07K14/765 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司37221 | 代理人： | 彭成 |
| 地址： | 250061 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种表达人血清白蛋白的靶向载体，包含有人血清白蛋白基因，以及进行同源重组的鸡源的两个同源序列5’同源臂、3’同源臂，同时还包含有进行药物筛选的neo基因和报告基因EGFP。本发明的表达人血清白蛋白的靶向载体可以用于制备转基因鸡，该转基因鸡繁殖后，其产生的卵（鸡蛋）中将会特异性地表达人血清白蛋白，而转基因鸡的其它细胞并不会表达人血清白蛋白，分离纯化方便，且由转基因鸡生产出来的人血清白蛋白在经过修饰之后更近似于人类体内正常的血清白蛋白，更有利于其发挥生物学功能。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 血清 白蛋白 靶向 载体 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种表达人血清白蛋白的靶向载体的构建方法，其特征在于：设计特异性引物，进行5’同源臂、3’同源臂和人血清白蛋白基因的扩增；然后，用pBluescriptIISK(+)载体构建同源臂与人血清白蛋白基因融合，然后将融合基因连接到EGFP‑ROSA‑26基因打靶载体上，再将3’同源臂连接到EGFP‑ROSA‑26基因打靶载体上，即得表达人血清白蛋白的靶向载体，构建的表达人血清白蛋白的靶向载体包含有人血清白蛋白基因，以及进行同源重组的鸡源的两个同源序列：5’同源臂、3’同源臂，5’同源臂的序列如SEQ ID NO.3所示，3’同源臂的序列如SEQ ID NO.4所示，人血清白蛋白基因的5’端连接有kozak序列，同时还包含有进行药物筛选的neo基因和报告基因EGFP。
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