[发明专利]中药百合中酚酸甘油酯苷化合物的高速逆流色谱分离方法及应用

摘要

一种中药百合中酚酸甘油酯苷化合物的高速逆流色谱分离方法，该方法以乙酸乙酯、正丁醇和0.5%乙酸水溶液按体积比3:1.5:5组成高速逆流溶剂体系，对中药百合提取物进行高速逆流色谱分离，制备得到中药百合中3个酚酸甘油酯苷化合物，同时对该些化合物的生物活性进行研究，该3个化合物对DPPH自由基具有一定的清除作用，对脂质过氧化有一定的抑制作用，并对α-淀粉酶活性均具有一定的促进作用。

主权项

一种中药百合中酚酸甘油酯苷化合物的高速逆流色谱分离方法，其特征在于：该方法步骤如下：a.制备百合提取物：取中药百合粉，加入5‑10倍质量的质量浓度为40‑60%的乙醇于50‑70℃水浴浸提3次，每次0.5‑1h，合并滤液，滤液减压浓缩至无醇味；将该提取液以1‑3BV/h流速通过装有D101大孔吸附树脂的层析柱，吸附后静置0.5‑1h，用蒸馏水以2‑4BV/h流速淋洗除去杂质，再用70%质量浓度的乙醇以2‑4BV/h流速洗至洗脱液无颜色，将乙醇洗脱液减压浓缩后冷冻干燥，即得百合提取物；b.高速逆流色谱法分离：将乙酸乙酯、正丁醇和0.5%乙酸水溶液按体积比3:1.5:5组成高速逆流溶剂体系，充分混合，静置分层过夜，将上相与下相分离，超声脱气；将制得的百合提取物按每200mg‑250mg加10‑20mL下相的比例用下相溶解作为样品溶液，将上相溶剂以20mL/min的流速注入高速逆流色谱仪，待上相溶剂充满后，在800‑900rpm/min的转速下将剩余下相以1.5‑2mL/min的流速注入，检测波长为280nm，平衡后将样品溶液进样，80‑100min后进行图谱采集，根据峰形手动分段收集流出液，将收集的流出液减压浓缩后冷冻干燥，得粉末状化合物regaloside A、化合物Acetylregaloside C及化合物regaloside B。