[发明专利]居泉沙雷菌多克隆抗血清、制备方法及其在检测沙门氏菌中的应用

摘要

发明公开了一种居泉沙雷菌多克隆抗血清及其制备方法以及在检测沙门氏菌中的应用，包括下列步骤：（1）居泉沙雷菌免疫抗原的制备；（2）抗原接种；（3）多克隆抗血清的采集；居泉沙雷菌多克隆抗血清在检测沙门氏菌中的应用包括含有居泉沙雷菌多克隆抗血清的沙门氏菌选择性增菌培养基及其沙门氏菌方法。本发明的多克隆抗血清可降低甚至完全抑制增菌液中居泉沙雷菌的数量，从而消除因居泉沙雷菌的存在而给沙门氏菌的检测带来的干扰，最终提高沙门氏菌分离鉴定的准确性，适用于现行的包括前增菌和选择性增菌步骤的沙门氏菌检测标准。该方法具有操作简单、结果准确可靠等优点。

主权项

一种居泉沙雷菌多克隆抗血清的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：（1）居泉沙雷菌免疫抗原的制备将居泉沙雷菌接种于营养琼脂，37℃，12h，刮取菌苔于0.85%的生理盐水中，加入终浓度为2%（v/v）的甲醛，感作37℃，24h，接甲醛感作的培养物接种营养琼脂进行无菌检测，确定甲醛感作的培养物无活菌的情况后，测定培养物蛋白浓度，应确保培养物的蛋白浓度大于2mg/mL，符合上述条件的情况下，以其为抗原；（2）抗原接种免疫接种新西兰大白兔，首免的接种剂量为2mg/只，第二次免疫于首免后7天进行，剂量同首免；第三次免疫于第二次免疫后14天进行，剂量为首免的一半；第三次免疫后，采血测定居泉沙雷菌抗血清的效价，抗血清效价不低于1：256时，采血；（3）多克隆抗血清的采集采集的血液先在室温放置30min，血液自然凝固后，放于37℃，12h，使血清析出，然后将其放于4℃，1h，使血凝块收缩，以易于分离血清，随后将血清无菌分离到灭菌的离心管中，所制备的血清可直接应用于沙门氏菌检测。