[发明专利]一种低成本纯化艾塞那肽的方法

摘要

本发明公开了一种低成本纯化艾塞那肽的方法，采用高效液相色谱法，先用强阳离子交换柱对大批量的艾塞那肽粗品进行粗纯，除去艾塞那肽粗品中的大部分杂质，从质和量两方面为精纯提供了方便，再用反相聚合物柱进行脱盐，然后用C18反相硅胶柱进行精纯，降低了生产成本，不仅能得到纯度大于98%的艾塞那肽，而且能达到纯化艾塞那肽成本低、收率高、产业化的要求。

主权项

一种低成本纯化艾塞那肽的方法，其特征在于它由下述步骤组成：（1）溶样将艾塞那肽粗品溶解于质量分数为20%的醋酸水溶液中，用质量分数为15%的氢氧化钠水溶液调节pH值至3.5～4.4，超声分散，用滤膜过滤，收集滤液；（2）粗纯用离子交换高效液相色谱法对滤液进行粗纯，填料为SP高流速琼脂糖微球的强阳离子交换柱，流动相A为0.02mol/L pH值为3.5～4.4的醋酸‑醋酸钠水溶液，流动相B为含有1mol/L氯化钠的0.02mol/L pH值为3.5～4.4的醋酸‑醋酸钠水溶液，进行梯度洗脱纯化，收集粗纯后的艾塞那肽溶液，减压浓缩；（3）脱盐将步骤（2）得到的浓缩液用反相高效液相色谱法进行脱盐，填料为F型SBC MCI GEI反相色谱填料的反相聚合物柱，流动相A为超纯水，流动相B为色谱级甲醇，进行梯度洗脱纯化，收集脱盐后的艾塞那肽溶液，减压浓缩；（4）精纯将步骤（3）得到的浓缩液用反相高效液相色谱法进行精纯，填料为C18反相硅胶柱，流动相A是质量分数为0.1%的醋酸水溶液，流动相B是质量分数为0.1%的醋酸乙腈溶液，进行梯度洗脱纯化，收集精纯后的艾塞那肽溶液，减压浓缩，冷冻干燥，得到艾塞那肽。