[发明专利]内含A型流感病毒M基因装甲RNA标准物质有效
| 申请号： | 201310541105.3 | 申请日： | 2013-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN103571865A | 公开（公告）日： | 2014-02-12 |
| 发明（设计）人： | 乔彩霞;倪建强;蒲静;高志强;张鹤晓;尹羿;汪琳;谷强;张利峰;张伟 | 申请（专利权）人： | 中华人民共和国北京出入境检验检疫局 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N7/01;C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93;C12R1/92 |
| 代理公司： | 北京正理专利代理有限公司 11257 | 代理人： | 赵晓丹 |
| 地址： | 100026*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种A型流感病毒核酸检测装甲RNA标准物质。该标准物质是利用MS2噬菌体装甲RNA技术，将A型流感病毒M基因用MS2噬菌体的衣壳蛋白包装而成，本发明制备的标准物质具有稳定、无生物传染性、可真实模拟病毒粒子结构、耐RNase等特性，适用于A型流感病毒以M基因为靶标的核酸检测方法的质量控制，以及检测试剂和实验室能力的评价。 | ||
| 搜索关键词： | 内含 流感病毒 基因 装甲 rna 标准 物质 | ||
【主权项】：
一种内含A型流感病毒M基因装甲RNA标准物质，其特征在于：它是通过如下方法制备：1）获得用于A型流感病毒核酸检测的M基因序列，如序列表中SEQ ID NO：1所示；2）将包含MS2噬菌体成熟酶蛋白基因和衣壳蛋白基因的序列及通过步骤1）获得M基因序列克隆于原核表达载体；3）将原核表达载体转入表达菌株中，诱导表达，然后采用超声波裂解，离心，收集上清液，获得表达产物；4）经Cellufine Sulfate树脂柱纯化、聚乙二醇沉淀和DNase消化，去除残留质粒DNA，得到内含A型流感病毒M基因装甲RNA病毒样颗粒。5）将内含流感病毒M基因的装甲RNA病毒样颗粒通过荧光定量RT‑PCR方法定值，稀释分装，即得。
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