[发明专利]一种溪蟹单细胞悬液的制备方法无效
申请号: | 201310406493.4 | 申请日: | 2013-09-09 |
公开(公告)号: | CN103436487A | 公开(公告)日: | 2013-12-11 |
发明(设计)人: | 王金香;王兰;刘娜;落继先;王茜;井维鑫 | 申请(专利权)人: | 山西大学 |
主分类号: | C12N5/07 | 分类号: | C12N5/07;C12N5/02 |
代理公司: | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人: | 杨耀田 |
地址: | 030006 山*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | 本发明提供了一种溪蟹单细胞悬液的制备方法,其步骤为:将溪蟹组织切成碎片,放入5-10℃、pH7.0-7.5的PBS溶液中,加入胰蛋白酶,进行酶解,用100-200目细胞筛过滤,酶液在8-12℃、800-1000rpm离心1-2分钟,去上清后,沉淀用PBS洗涤两次,即可。本发明操作简单,它能将溪蟹的组织细胞完全分离得到单细胞悬液,并且成活率达到95%以上。利用本方法分离得到的单细胞可以直接进行细胞体外培养及单细胞实验。 | ||
搜索关键词: | 一种 单细胞 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种溪蟹单细胞悬液的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:剖取溪蟹组织,在不破坏细胞完整性的情况下,将组织切成0.5‑1mm2的碎片,放入5‑10℃、pH 7.0‑7.5的PBS溶液中,加入胰蛋白酶至终浓度为2.0‑3.0%,酶液在8‑12℃下10‑20转/分钟的摇床上酶解5‑15分钟,用100‑200目细胞筛过滤,800‑1000rpm离心1‑2分钟,去上清后,沉淀用PBS洗涤两次,即可得到溪蟹单细胞悬液。
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