[发明专利]一种肝素钠粗品的提取方法

摘要

本发明涉及一种肝素钠粗品的提取方法，原料来源于新鲜的猪肺或解冻的猪肺，绞成糊状料，加入细胞活化剂催化，再经生物酶酶解、除杂分离过滤得到含有肝素钠的溶液，再经树脂吸附、洗脱及有机溶剂沉淀、干燥得到肝素钠粗品。本发明肝素钠粗品的提取方法能够提高产品品质及有效收得率、降低生产成本，适用于工业化生产，减少废弃物排放，具有社会、环保、经济效益。

主权项

一种肝素钠粗品的提取方法，其特征在于，包括：1）将新鲜猪肺或解冻的猪肺经剥离去除气管、脂肪后绞成糊状料，得猪肺浆料，向猪肺浆料中加入0.4～0.6倍猪肺浆料重量的去离子水，再分别加入占猪肺浆料重量0.1%～0.3%的防腐剂及细胞活化剂，在20～30℃间歇搅拌反应2～4小时后，得第一猪肺浆料液，向第一猪肺浆料液中加入1～3倍第一猪肺浆料液重量的去离子水，得第二猪肺浆料液，再加入占第二猪肺浆料液重量2%～6%的氯化钠，用氢氧化钠溶液调pH至8～9，在25℃下间歇搅拌反应3～4小时，得猪肺碱解液；2）将步骤1）得到的猪肺碱解液缓慢加热至40℃，加氢氧化钠溶液调pH值至8～9，加入占猪肺碱解液重量0.01%～0.2%的蛋白复合酶，再加入氯化钠使猪肺碱解液中氯化钠的浓度为10%～13%，搅拌2～3小时后再缓缓升温至60℃，保温、搅拌反应4～6小时，得到猪肺酶解液；3）将步骤2）得到的猪肺酶解液10～20分钟快速升温至90℃，保温0.5～1h后加入占猪肺酶解液重量0.1%～2%的蛋白沉淀剂，搅拌0.5～1小时，静止沉淀，用100目尼龙袋过滤，收集清液；4）将步骤3）得到的清液降温至60～70℃，采用管式离心机液液蛋白分离设备处理，得到肝素钠纯浆液；5）向步骤4）得到的肝素钠纯浆液中加入0.1～2倍体积的去离子水并升温至50℃，再加入2～8%的树脂，用氢氧化钠溶液调pH值至8～9，搅拌4～6小时使树脂充分吸附，静置0.5～1小时后用80目尼龙袋过滤收集所吸附的树脂；6）向步骤5）得到的树脂中加入2～4倍树脂重量的去离子水及与树脂等重量的3.5mol/L的氯化钠溶液，调pH至9～10，搅拌洗脱树脂，用80目尼龙袋过滤收集滤液作为为第一次滤液，向过滤出的树脂中再加入2倍树 脂重量的去离子水及0.5倍树脂重量的3.5mol/L的氯化钠溶液，再洗脱一次，得到第二次滤液，合并两次滤液；7）向步骤6）得到的滤液中加入1～2倍体积的95%预冷乙醇，搅拌20～24分钟，静置12～15小时后吸除乙醇，收集下层沉淀物，滤干，用无水乙醇冲洗脱水，再用丙酮脱水，在60℃下真空干燥得到肝素钠粗品。