[发明专利]水产品中硒形态的检测方法

摘要

一种水产品中硒形态的检测方法，属于水产品检测技术领域，水产品中的硒形态采用超级恒温混匀仪震荡提取，用高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱联用形态分析技术测定，提取液通过阴离子色谱柱对其分离，由流动相将不同形态的硒依次洗脱，洗脱溶液经过硼氢化钾还原剂和盐酸发生氢化反应，生成氢化物进入原子化器，与原子荧光联用进行分析测定。从而给出了水产品中的硒更为完整的生物学特性；该实验条件选择合理，检测数据准确可靠，样品回收率在88.79%-94.88%，精密度小于5%，该方法具有灵敏度高、干扰小、样品前处理简单，既能准确测无机硒：亚硒酸盐、硒酸盐，同时也能测定有机硒：硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸等优点，可以用于水产品中硒形态的检测。

主权项

一种水产品中硒形态的检测方法，包括：1）选用的仪器及设备，2）配置试剂与标准溶液，3）进行测试步骤，4）所用的仪器条件，5）结果计算；其特征在于具体步骤如下：1）选用的仪器及设备：HPLC‑HGAFS联用系统：（1）HPLC部分，使用L C‑10ATVP高压液相泵；配有100μL定量环的7725i六通进样阀；采用Hamilton PRP‑X100、250mm×4.1mm i.d,10μm的阴离子色谱柱，配有相同材质填料的保护柱25mm×2.3mm i.d，12‑20μm；（2）HGAFS‑9130原子荧光光度计，配有激发光源，高性能硒空心阴极灯，形态分析测量软件；（3）冷却循环水；（4）超级恒温混匀仪；（5）砂芯过滤器；（6）循环式真空泵；（7）离心机；（8）数控超声清洗器；（9）0.45μm的水系微孔滤膜；（10）纯度≥99.99%氩气；2）配置试剂与标准溶液（1）试剂：体积比为7%盐酸溶液、终浓度为5g/L氢氧化钾溶液+终浓度为20g/L硼氢化钾溶液的混合溶液，流动相为pH6.0浓度为40mmol/L磷酸氢二铵溶液；（2）硒形态的标准使用液的配置：通过溶解相应量的Se(VI)、Se(IV)、SeMet、SeCys得到1mg/L的各单标溶 液的储备标准溶液,用水逐级稀释成5.0ng/mL、25.0ng/mL、50.0ng/mL、75.0ng/mL、100.0ng/mL的标准使用液；3）进行测试步骤:准确称取样品置容器中，加去离子水混匀，至70℃超级恒温混匀仪震摇1h，使试样充分浸提后，取出冷却，离心，取出上清液用0.45微米的水水系微孔滤膜过滤，上机测定硒形态的值；4）所用的仪器条件：（1）液相色谱条件：流动相pH6.040mmol/L(NH4)2HPO4，流速1mL/min；进样体积100μL；辅阴极46mA；蠕动泵转速65rpm；（2）氢化物发生条件：还原剂成分：终浓度为5g/L氢氧化钾溶液+终浓度为20g/L硼氢化钾溶液的混合溶液,流速：6.0mL/min；载流成分：体积比7%HCl,流速：6.0mL/min；（3）原子荧光光谱条件：高性能硒空心阴极灯，负高压300V，灯电流60mA；载气为氩气，400mL/min；屏蔽气为氩气，600mL/min；5）结果计算:根据色谱图对硒各形态进行定性与定量计算。