[发明专利]磁珠法快速纯化抗体无效
| 申请号： | 201310257062.6 | 申请日： | 2013-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN103275217A | 公开（公告）日： | 2013-09-04 |
| 发明（设计）人： | 李华;梁永波;陆启玉 | 申请（专利权）人： | 河南工业大学 |
| 主分类号： | C07K16/00 | 分类号： | C07K16/00;C07K1/14 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 450001 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物和制药行业，其利用亲和层析原理，将羧基磁珠活化后，连接上能与人和多种哺乳动物IgG分子Fc段结合的葡萄球菌A蛋白（SPA），所得Protein A磁珠可用于血清、腹水或细胞培养液中抗体的纯化。Protein A磁珠在抗体纯化方面特异性强、方便快捷，可广泛应用于生物和制药行业。 | ||
| 搜索关键词： | 磁珠法 快速 纯化 抗体 | ||
【主权项】：
磁珠法快速纯化抗体，其特征包括以下步骤一：SPA亲和磁珠的制备（1）取羧基磁珠；（2）蒸馏水清洗磁珠；（3）用pH值5.0 MES缓冲溶液清洗羧基磁珠；（4）采用EDC/NHS法活化羧基磁珠：根据羧基磁珠上羧基的量，配制EDC/NHS溶液；（5）摇床上，适宜温度下进行充分活化；（6）活化完成，用MES缓冲液清洗磁珠2次；（7）SPA蛋白连接：一定条件下进行偶联，反应缓冲液为0.02M pH7.4的PBS缓冲液；（8）连接结束后，磁分离，上清用差量法计算磁珠载体表面的SPA蛋白结合量；（9）终止反应：加入终止液，摇床上振荡；（10）磁分离1min，吸走上清，得到偶联好的ProteinA磁珠；（11）用10mM pH7.4 的PBS缓冲液清洗ProteinA磁珠2次，并保存在缓冲液中备用。
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