[发明专利]具有高抗疲劳活性的梅鱼鱼鳔胶原蛋白的制备工艺

摘要

本发明提供了一种具有高抗疲劳活性的梅鱼鱼鳔胶原蛋白的制备工艺，采用海产品加工废料—梅鱼鱼鳔作为提取原料，先将梅鱼鱼鳔除杂蛋白、脱脂，然后先用胃蛋白酶提取胶原蛋白，再将胃蛋白酶提取胶原蛋白后所得沉淀用复合酶提取胶原蛋白，合并提取到的胶原蛋白，离心干燥后得到具有高抗疲劳活性的梅鱼鱼鳔胶原蛋白。胶原蛋白提取率高，能够有效利用废弃的梅鱼鱼鳔，提高了经济效益，制得的胶原蛋白常温下可溶于蒸馏水，无异味，苦味，抗疲劳活性好，无明显毒副作用。

主权项

一种具有高抗疲劳活性的梅鱼鱼鳔胶原蛋白的制备工艺，其特征在于：包括如下步骤：（1）梅鱼鱼鳔去除内壁薄膜及血管，清水洗净，接着将梅鱼鱼鳔除杂蛋白及脱脂；（2）将步骤（1）处理得到的梅鱼鱼鳔按照1:30‑40(m/v)的料液比加入pH 为1.9‑2.1的磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲液，再加入梅鱼鱼鳔重量1%‑1.5%的胃蛋白酶，在4±0.5℃下酶解24‑36h，加入终浓度为20±1mmol/L的EDTA灭酶，室温离心15‑20min，取上清液用活性炭除色素后，在4±0.5℃下离心30‑40min，收集上清液，先于pH为3.5‑4.0的的磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲液中透析12±1h，再于pH为5.5‑6.0的磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲液中透析12±1h，最后于蒸馏水中透析至中性，得到梅鱼鱼鳔胶原蛋白A提取液；（3）收集步骤（2）两次离心产生的沉淀，将沉淀按照1:40‑45(m/v)的料液比加入pH为8.4‑8.6的磷酸氢二钠‑碳酸盐缓冲液，加入沉淀重量1%‑1.5%的复合酶，在4±0.5℃下酶解24‑36h，加入终浓度为20±1mmol/L的EDTA灭酶，在4±0.5℃下离心30‑40min，取上清液用活性炭除色素后，先于pH为7.9‑8.0的磷酸氢二钠‑碳酸盐缓冲液中透析12±1h，再于pH为7.5‑7.7的磷酸氢二钠‑碳酸盐缓冲液中透析12±1h，最后于蒸馏水中透析至中性，得到梅鱼鱼鳔胶原蛋白B提取液；（4）合并梅鱼鱼鳔胶原蛋白A提取液和梅鱼鱼鳔胶原蛋白B提取液，4±0.5℃下离心15‑20min，浓缩后冷冻干燥。