[发明专利]新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺

摘要

本发明涉及一种生物药用原料的制备纯化方法，属于生物工程领域，具体是一种制备高纯度低分子肝素钠的工艺。本发明的目的为了改进现有技术的不足而提供一种制备高纯度低分子肝素钠的工艺；该发明提供一种简便的低分子肝素钠制备、纯化技术，制得的低分子肝素钠平均分子质量在4．5KDa左右，效价不低于180U／mg，高于中国药典要求的170U／mg，且依据中国药典肝素钠检测标准检测合格。

主权项

一种新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺，其具体步骤如下：    (1)将粗品肝素钠溶于NaCl溶液中，机械搅拌至肝素钠全部溶解，向溶液中加入碱液直至产生沉淀，静置，过滤除去不溶物，得滤液；    (2)将步骤(1)中滤液以碱液调pH至9．5—10．5，加入H202溶液，在10—30℃下反应2．5—3．5小时，得反应液；    (3)将步骤(2)得到的反应液升温至30—50℃，此后每隔2．5—3．5小时补加H202溶液，并调节pH；补料后共反应15—21h；    (4)向步骤(3)得到的反应液中加入吸附剂，磁力搅拌，过滤除不溶物，得滤液；    (5)将步骤(4)中的滤液通过平衡好的凝胶色谱柱，收集低分子量的肝素钠洗脱液；    (6)将步骤(5)中的低分子量的肝素钠洗脱液用弱碱性离子交换树脂吸附，分别以三种浓度的NaCl溶液洗脱，收集第一种(最低)、第三种(最高)浓度的NaCl洗脱液并混合；    (7)将步骤(6)中的混合洗脱液，在磁力搅拌下降温至一5—8℃，再用乙醇沉淀、真空干燥得产品。