[发明专利]微量测定阳离子抗菌肽最小抑菌和最小杀菌浓度的方法有效

专利信息
申请号: 201310065813.4 申请日: 2013-03-01
公开(公告)号: CN103173517A 公开(公告)日: 2013-06-26
发明(设计)人: 汪以真;李治学;韩菲菲;黄霞;刘丹 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12Q1/18 分类号: C12Q1/18
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 33200 代理人: 张法高
地址: 310027 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了一种微量测定阳离子抗菌肽最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的方法,包括以下步骤:1)试剂配制:配制MHB培养基;2)细菌悬液制备:复苏细菌至对数生长期,制备浓度一定的细菌悬液;3)细菌悬液计数:倍比稀释步骤2)中的细菌悬液后滴板计数;4)药剂稀释:倍比稀释药剂至不同测试浓度梯度;5)测定最小抑菌浓度:将步骤4)中稀释好的药剂与步骤2)中制备的细菌悬液混合后培养,观察是否有肉眼可见的细菌沉淀;6)测定最小杀菌浓度:将步骤5)中有抑菌效果的测试滴板后培养,观察是否有菌落生长。采用该方法测定阳离子抗菌肽最小抑菌浓度和最小杀菌浓度具有干扰小、微量、方便、快捷的特点。
搜索关键词: 微量 测定 阳离子 抗菌 最小 杀菌 浓度 方法
【主权项】:
一种微量测定阳离子抗菌肽最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)试剂配制:配制Mueller Hinton Broth培养基;2)细菌悬液制备:培养细菌至对数生长期,制备细菌悬液;3)细菌悬液计数:倍比稀释所述的步骤2)中的细菌悬液后滴板计数;4)阳离子抗菌肽稀释:倍比稀释阳离子抗菌肽至不同测试浓度梯度;5)测定最小抑菌浓度:将所述的步骤4)中的不同测试浓度梯度的阳离子抗菌肽与步骤2)中制备的细菌悬液混合后培养,观察是否有肉眼可见的细菌沉淀,无肉眼可见细菌沉淀的孔对应的最小浓度即为最小抑菌浓度;6)测定最小杀菌浓度:将所述的步骤5)中有抑菌效果的测试滴板后培养,观察是否有菌落生长无菌落生长扇区对应的最小浓度即为最小杀菌浓度。
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