[发明专利]一种用于转基因水稻PCR检测的重组标准质粒及试剂盒无效

专利信息
申请号: 201310065279.7 申请日: 2013-03-01
公开(公告)号: CN103146824A 公开(公告)日: 2013-06-12
发明(设计)人: 徐俊锋;陈笑芸;汪小福;缪青梅;朱妍晴;朱青 申请(专利权)人: 浙江省农业科学院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/63
代理公司: 杭州天正专利事务所有限公司 33201 代理人: 黄美娟;冷红梅
地址: 310021 *** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明提供了一种用于转基因水稻KF6、TT51、KMD1的定性和定量PCR检测的重组标准质粒,由如下方法获得:将SEQ ID No.1所示的KF6侧翼序列、SEQ ID No.2所示的TT51侧翼序列、SEQ IDNo.3所示的KMD1侧翼序列和SEQ ID No.4所示的PLD基因依次连接获得融合片段,再将所得融合片段克隆到载体pMD18-T中,获得所述重组标准质粒,记为pMD-KTK。该重组标准质粒可以替代转基因水稻KF6、TT51和KMD1的阳性标准品,用于对转基因水稻KF6、TT51、KMD1转化体特异性定性和定量PCR检测,具有特异性好、灵敏度高等优点,应用该重组标准质粒进行实际样品定量分析时,样品检测结果的偏差在国际上广泛认可的允许范围内,很好地解决了转基因水稻KF6、TT51、KMD1在检测过程中阳性标准品匮乏的问题。
搜索关键词: 一种 用于 转基因 水稻 pcr 检测 重组 标准 质粒 试剂盒
【主权项】:
一种用于转基因水稻KF6、TT51、KMD1的定性和定量PCR检测的重组标准质粒,由如下方法获得:将SEQ ID No.1所示的KF6侧翼序列、SEQ ID No.2所示的TT51侧翼序列、SEQ ID No.3所示的KMD1侧翼序列和SEQ ID No.4所示的PLD基因依次连接获得融合片段,再将所得融合片段克隆到载体pMD18‑T中,获得所述重组标准质粒,记为pMD‑KTK。
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