[发明专利]一种基于受体传感器检测苦味物质地那的方法

摘要

本发明公开了一种基于受体传感器检测苦味物质地那的方法，首先在HEK-293细胞表面表达了带有His6-tag标签的苦味受体蛋白T2R4，并提取苦味受体蛋白T2R4将其利用适配体有效地固定在石英晶体微天平表面构建成受体传感器；通过测试一系列含已知确定浓度苦味物质地那的溶液，得到地那浓度-谐振频率改变量标准曲线；然后测试含有未知浓度苦味物质地那的待测溶液，根据石英晶体微天平谐振频率的改变量和地那浓度-谐振频率改变量标准曲线得到待测溶液中苦味物质地那的浓度。本发明方法所需仪器简单、操作方便，解决了敏感元件苦味受体蛋白T2R4与石英晶体微天平的稳定耦合，实现了液相环境中苦味物质地那的快速检测。

主权项

一种基于受体传感器检测苦味物质地那的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）制备苦味受体蛋白T2R4；（2）将苦味受体蛋白T2R4固定在石英晶体微天平传感器表面制成受体传感器；（3）将不含任何苦味物质的水溶液泵入密闭的检测腔内，待石英晶体微天平传感器的谐振频率达到一个稳定的状态后，再将含有某一确定浓度的苦味物质地那的溶液泵入检测腔，待石英晶体微天平传感器的谐振频率再次稳定后，谐振频率的改变量即为此确定浓度的传感器响应值，最后再泵入不含任何苦味物质的水溶液，清洗检测腔，即完成一次检测过程；至少间隔10min后，待石英晶体微天平传感器的谐振频率稳定后，再泵入含有另一确定浓度的苦味物质地那的溶液进行下一次检测；重复上述步骤，可以得到一系列苦味物质地那的浓度对应的传感器谐振频率改变量，得到地那浓度‑谐振频率改变量曲线；（4）对于未知浓度的苦味物质地那，首先将不含任何苦味物质的水溶液泵入密闭的检测腔内，待石英晶体微天平传感器的谐振频率达到一个稳定的状态F0后，再将含有未知浓度的苦味物质地那的待测溶液泵入检测腔，待石英晶体微天平传感器的谐振频率稳定到F1后，得到谐振频率改变量F1‑ F0，最后根据上述步骤3得到的地那浓度‑谐振频率改变量曲线得到待测溶液中苦味物质地那的浓度，实现液相中苦味物质地那的浓度检测。