[发明专利]一种酶催化活化金银花叶提取绿原酸的方法

摘要

一种酶催化活化金银花叶提取绿原酸的方法，属于绿原酸提取技术领域。本发明以金银花叶固体废弃物为原料，经金银花叶原料处理、酶解反应、超声波协同浸提、绿原酸制备的简单工艺而得到产品。本发明方法的原料廉价易得，具有废物利用充分，制备的绿原酸产品提取率和纯度高、且生物活性完备，生产过程中能耗低，生产设备腐蚀小，有机溶剂使用量少，有利于环境保护等特点。本发明可广泛应用于从金银花叶固体废弃物中提取绿原酸、异绿原酸和白果醇等天然产物，有效实现了金银花叶的资源化再利用。

主权项

一种酶催化活化金银花叶提取绿原酸的方法，其特征在于所述方法的具体步骤如下： (1)原料预处理 以金银花叶固体废弃物为原料，先将原料用水清洗干净后，放置于烘箱中，先在85～110℃的烘箱中烘30～90min，再经粉碎机粉碎后、并过20～160目筛，未过筛的原料返回粉碎机中再粉碎，收集过筛原料，即为预处理后的金银花叶固体废弃物； (2)酶解反应 第(1)步骤完成后，先按照第(1)步处理后的原料的质量∶酶的质量∶水的体积之比为1g∶0.05～0.3g∶5～30ml的比例，所述的酶为纤维素酶或木质素酶或纤维素酶和木质素酶复配酶，所述的复配酶为木质素酶∶纤维素酶的质量比为1g∶0.5～3g，在第(1)步预处理后的原料中，加入酶及水，搅拌均匀后，再用硫酸或氢氧化钠溶液调节体系的pH值为3～8，然后将调节pH值后的混合液放置于摇床中，在水浴温度为20～65℃下进行酶解活化2～14h，用抽滤泵进行抽滤，分别收集滤液和滤渣，收集的滤渣为金银花叶酶解活化基料；滤液处理达标后排放； (3)超声波处理 第(2)步骤完成后，先将第(2)步收集的滤渣，即金银花叶酶解活化基料转入到浸提容器中，再按照第(1)步骤预处理后的金银花叶固体废弃物的质量∶乙醇溶液的体积之比为1g∶8～15ml的比例，在浸提容器中加入乙醇溶液，搅拌混合均匀，并在超声波功率40～200W、温度25～55℃条件下进行超声波处理10～45min后，用抽滤机进行抽滤，分别收集滤液和滤渣，对收集的滤渣作为制备吸附材料的原料，将收集的滤液转入离心机中，在离心转速为2500～4000r/min条件下，进行离心分离5～15min后，分别收集离心清液和离心渣，离心清液即为含绿原酸的提取液，对收集的离心渣作为制备吸附材料的原料； (4)绿原酸产品制备 第(3)步骤完成后，先将第(3)步收集的离心清液，即含绿原酸的提取液通过分光光度法测定绿原酸的浓度，检测波长为325～335nm、乙醇溶液体积溶度为50～65％的条件下，测定第(3)步收集的离心清液中绿原酸的浓度，再将第(3)步收集的离心清液放置于在旋转蒸发器中，在真空压强为0.1～0.6Mpa、温度为30～60℃下，进行减压浓缩至粘稠状得绿原酸粗制品，然后，按照绿原酸粗制品的质量∶乙醇溶液的体积之比为1g∶2～10ml的比例，在浸提容器中加入绿原酸粗品和乙醇溶液，混合溶解均匀，最后，通过旋转蒸发器，在真空压强为0.1～0.6Mpa、温度为30～60℃下，进行减压浓缩重复2～4次，制得绿原酸产品，绿原酸提取率达83.0～97.2％，纯度达84.0％～92.6％。