[发明专利]一种鲑科鱼卵发育过程的观测方法

摘要

一种鲑科鱼卵发育过程的观测方法，它涉及鱼卵发育过程的观测方法，本发明要解决现有鲑科鱼卵发育过程的观测方法中存在细胞分裂期细节很难观测以及显微成像不清晰的问题。本发明中一种鲑科鱼卵发育过程的观测方法按以下步骤进行：一、前期准备：然后配制鱼卵固定液并放置于冰箱中保存；二、样品采集：采集鲑科鱼类受精卵放入到装有鱼卵固定液的采样管中并放置于冰箱中保存；三、发育观测：从固定液中取出鱼卵放在载破片上，用解剖针轻轻剥掉卵膜，放在解剖镜下观测，并拍照，根据每个采样管上注明的不同标号和不同发育期，全程记录鲑科鱼类由受精后0h至破膜时的整个发育过程。本发明适用于鲑科鱼类受精卵发育过程的观测和研究应用领域。

主权项

一种鲑科鱼卵发育过程的观测方法，其特征在于它是通过以下步骤实现的：一、前期准备：首先准备观测所需工具，包括：捞鱼网、规格为5ml的采样管、小镊子、解剖针、载玻片、带有拍照功能的解剖镜；然后配制鱼卵固定液，称取20g~50g的苦味酸放入盛有400ml~600ml蒸馏水的烧杯中，用玻璃棒反复搅动20min~40min后，将烧杯口用封口膜封紧，放置于3℃~5℃的冰箱中，放置20h~28h后，用滤纸过滤并取上清液，量取350ml~450ml此上清液放入另一个烧杯中，并向此烧杯中加入80ml~120ml甲醛和16ml~24ml冰醋酸，混合均匀后，装入不透明且带盖的容器中，放置于3℃~5℃的冰箱中备用；二、样品采集：鲑科鱼类受精卵孵化水温为7℃~9℃，需要18d~22d才能孵化破膜，具体采样间隔如下：受精后0h~3h内，每间隔15min采样一次；受精后3h~8h内，每30min采样一次；受精后8h~33h内，每间隔1h采样一次；受精后33h~81h内，每间隔2h采样一次；受精后81h~129h内，每间隔6h采样一次；受精后129h~215h每间隔12h采样一次；受精后215h至破膜时，每间隔24h采样一次；样品采集过程：首先在每个采样管上注明不同的标号和不同的发育期，然后向每个采样管中注入2ml~4ml步骤一中配制的鱼卵固定液，每次采样时取受精卵15个~20个放入到装有鱼卵固定液的采样管中，摇晃1min~3min后，将采样管放置于3℃~5℃的冰箱中，20h~28h后将采集的受精卵更换一次等量的步骤一中配制的鱼卵固定液，即完成鲑科鱼类受精卵的样品采集；三、发育观测：从固定液中取出鱼卵放在载破片上，鱼卵的胚体朝上，用镊子夹住鱼卵，用解剖针轻轻剥掉卵膜，放在解剖镜下观测，并拍照，根据每个采样管上注明的不同标号和不同发育期，全程记录鲑科鱼类由受精后0h~破膜时的整个发育过程。