[发明专利]乳胶半固体培养基及其制备方法和杂交瘤细胞筛选方法

摘要

本发明涉及一种半固体培养基，其包括甲基纤维素溶液、2×1640培养基、L-谷氨酰胺溶液、β-巯基乙醇溶液、胎牛血清、青霉素与链霉素混合溶液、HAT溶液及乳胶抗原颗粒。该半固体培养基可直接用于杂交瘤细胞的培养和筛选，不仅能减少培养过程总亚克隆的次数，在很大程度上降低劳动强度，而且可以使单个细胞株之间生长空间相对独立，减少克隆株与克隆株之间的接触抑制备用。此外，本发明还涉及一种半固体培养基的制备方法以及使用该半固体培养基的杂交瘤细胞筛选方法。

主权项

一种乳胶半固体培养基，其特征在于，包括如下体积份数的各组分：浓度为0.4g/ml的甲基纤维素溶液                              10；pH  7.0~7.4的2×1640培养基                                 18；浓度为1mol/l的L‑谷氨酰胺溶液                               0.16；浓度为1mmol/l的β‑巯基乙醇溶液                             0.5；胎牛血清                                                   10；10000单位/ml的青霉素与10000μg/ml链霉素混合溶液            0.4；50×HAT溶液                                                0.8；及乳胶抗原颗粒溶液                                           1；其中，每毫升所述乳胶抗原颗粒溶液中包括50μg的抗原、0.1ml质量分数为10%的聚苯乙烯乳胶溶液及0.9ml0.1mmol/l的磷酸盐磷酸盐缓冲液。