[发明专利]一种基于适配体识别的鼠伤寒沙门氏菌可视化检测方法

摘要

本发明提供了一种基于适配体识别的鼠伤寒沙门氏菌可视化检测方法，其基本原理是在微孔板表面包被亲和素，用生物素化沙门氏菌适配子、纳米金标记的巯基化沙门氏菌适配子识别目标沙门氏菌，在此基础上，再利用银增强技术进一步放大检测信号，实现可视化检测。本方法具有特异性强、灵敏度高、简单、快速的优点，为快速检测环境中的鼠伤寒沙门氏菌提供了可能。

主权项

一种基于适配体识别的鼠伤寒沙门氏菌可视化检测方法，其步骤为： 1)合成生物素和巯基修饰的鼠伤寒沙门氏菌适配体。 2)制备纳米金 3)制备纳米金‑适配体探针 4)亲和素包被酶标板. 5)牛血清蛋白(BSA)封闭酶标板 6)每孔加入10μL浓度为10‑5M的生物素修饰的沙门氏菌适配体，37℃摇床30min。用1×PBS洗涤3次，拍干。 7)每孔加入30μL的样品，37℃摇床30min。用1×PBS洗涤3次，拍干。 8)每孔加入30μL的纳米金‑适配体探针，37℃摇床30min。用1×PBS洗涤1次，拍干；再用0.02mol/L的PBN缓冲液(0.3mol/L NaNO3和10mmol/L Na2HPO4/NaH2PO4，pH 7)洗涤两次，每次3min，拍干，以除去微孔板中游离的纳米金探针。 9)银增强显色 10)酶标仪检测吸光度值。