[发明专利]对虾白斑综合症病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种对虾白斑综合症病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒，由下述试剂组成：试剂A：将十六烷基三甲基溴化铵、NaCl、乙二胺四乙酸和羟基甲基氨基甲烷-盐酸加水制成；试剂B：蛋白酶K，溶剂是灭菌双蒸水；试剂C：乙醇水溶液；试剂D：用含MgCl2的PCR反应缓冲液、Taq DNA聚合酶、灭菌双蒸水混合制成；试剂E：引物P1，引物P2，脱氧核糖核苷酸混合制成；试剂F:荧光探针预混溶液；试剂G：对虾白斑综合症病毒阳性质粒；灭菌双蒸水；DNA吸附柱。本发明的试剂盒检测灵敏度高，可用于养殖对虾白斑综合症病毒早期感染及跟踪监测，还能用于与该病毒增殖相关的基础科学研究。

主权项

一种对虾白斑综合症病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒，其特征是由下述试剂组成：试剂A：将十六烷基三甲基溴化铵、NaCl、乙二胺四乙酸和羟基甲基氨基甲烷‑盐酸加水100ml，使试剂A中含有1.5‑3g的十六烷基三甲基溴化铵，NaCl的浓度为1.3‑1.5M，乙二胺四乙酸的浓度为15‑25mM，羟基甲基氨基甲烷‑盐酸的浓度为15‑25mM,调节pH＝7.5制成试剂A；试剂B：浓度为20‑30mg/ml的蛋白酶K，溶剂是灭菌双蒸水；试剂C：体积百分浓度为70‑80%的乙醇水溶液；试剂D：按比例用10倍含MgCl2的PCR反应缓冲液2.5μl、Taq DNA聚合酶1.5U、灭菌双蒸水17.7μl混合制成；试剂E：按比例用0.5μL，10μM的用SEQ ID NO.1所示的引物P1，0.5μl，10μM的用SEQID NO.2所示的引物P2，1.5μl，10mM脱氧核糖核苷酸混合制成；试剂F:1.0μl，10μM的荧光探针预混溶液，溶剂是灭菌双蒸水；所述荧光探针用5’‑TET‑SEQID NO.3‑TAMRA‑3’表示；试剂G：对虾白斑综合症病毒阳性质粒；灭菌双蒸水；DNA吸附柱。