[发明专利]一种缢蛏酶解多肽的制备方法及应用在审

专利信息
申请号: 201210462408.1 申请日: 2012-11-15
公开(公告)号: CN103805662A 公开(公告)日: 2014-05-21
发明(设计)人: 丁国芳;李丽;黄芳芳;闫海强 申请(专利权)人: 浙江海洋学院
主分类号: C12P21/06 分类号: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;A61K38/01;A61P35/00
代理公司: 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 代理人: 袁忠卫
地址: 316000 浙江省舟山市*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 一种缢蛏酶解多肽的制备方法及应用,其特征在于步骤为:将缢蛏去壳、洗净绞碎,按料液质量比1:3~5加水匀浆,调节pH值至5.5~6.5;加入蛋白酶进行酶解,蛋白酶的加入量为缢蛏质量的0.2%~0.3%,酶解温度为60~70℃,酶解时间1.5~2.5小时;酶解后灭酶处理,再离心取上清液即为酶解液;将酶解液经超滤、G-25凝胶色谱柱层析、反相高效液相色谱洗脱得到所需的缢蛏酶解多肽。本发明制备工艺简单,制得的缢蛏酶解多肽敏感性高、稳定性好及副作用少,MTT检测对DU-145和PC-3细胞的增殖有显著抑制作用,可用于体外抗前列腺癌,本发明对于进一步研究与开发以缢蛏酶解多肽为基础的功能性食品和药物,提高缢蛏的经济价值具有重大意义。
搜索关键词: 一种 缢蛏酶解 多肽 制备 方法 应用
【主权项】:
一种缢蛏酶解多肽的制备方法,其特征在于步骤为:1)前处理:将缢蛏去壳、洗净绞碎,按料液质量比1:3~5加水匀浆,调节pH值至5.5~6.5;2)酶解:加入蛋白酶进行酶解,蛋白酶的加入量为缢蛏质量的0.2%~0.3%,酶解温度为60~70℃,酶解时间1.5~2.5小时;3)酶解后灭酶处理,再离心取上清液即为酶解液;4)将酶解液经超滤、G‑25凝胶色谱柱层析后收集的各个洗脱峰浓缩后冷冻干燥,将干燥后得到的各个峰组分采用MTT法进行抗肿瘤活性实验,确定目标肽所在的洗脱峰,并对该峰大量收集,浓缩并冷冻干燥;5)最后,采用反相高效液相色谱进行洗脱纯化得到所需的缢蛏酶解多肽。
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