[发明专利]转植酸酶基因玉米或饲料中植酸酶基因的定量检测方法有效
| 申请号： | 201210400763.6 | 申请日： | 2012-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN102876800A | 公开（公告）日： | 2013-01-16 |
| 发明（设计）人： | 杨文竹;初晓宇;陈茹梅;伍宁丰;范云六;姚斌 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京市德权律师事务所 11302 | 代理人： | 余光军 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种转植酸酶基因玉米种子或含有该玉米种子的饲料中植酸酶基因的定量检测方法，包括以下步骤：(1)建立转植酸酶基因玉米定量检测标准曲线和线性方程；(2)以待检测样品的DNA为模板，分别以扩增玉米内参基因的一对特异引物、扩增植酸酶基因的一对特异引物或者扩增植酸酶基因表达框中构建载体终止子与基因结合区域的一对特异引物进行实时荧光定量PCR扩增，计算出Ct值差值，将Ct值差值代入所构建的标准曲线和线性方程，得到待检测样品中植酸酶基因的含量。本发明方法能够快速、准确、高通量的测定转基因玉米或添加了转植酸酶基因玉米饲料中的转植酸酶基因的含量，具有操作简便、准确、灵敏度高、避免交叉污染等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 转植酸酶 基因 玉米 饲料 中植酸酶 定量 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种转植酸酶基因玉米种子或含有转植酸酶基因玉米种子的饲料中植酸酶基因的定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)建立转植酸酶基因玉米定量检测标准曲线和线性方程；(2)以待检测样品的DNA为模板，分别以扩增玉米内参基因的一对特异引物、扩增植酸酶基因的一对特异引物或者是扩增植酸酶基因表达框中构建载体终止子与植酸酶基因结合区域的一对特异引物进行实时荧光定量PCR扩增，计算出二次实时荧光定量PCR扩增的Ct值差值，将Ct值差值代入步骤(1)所构建的标准曲线和线性方程，得到待检测样品中植酸酶基因的含量。
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