[发明专利]一种分离纯化小胶质细胞的方法

摘要

本发明属于肿瘤基础研究领域，涉及一种胶质瘤标本中分离纯化小胶质细胞的方法。本发明的方法包括将肿瘤组织用机械法联合酶消化法制成细胞悬液；密度梯度离心法，富集筛选出较高纯度的CD11b+的小胶质细胞，然后用CD11b+磁珠进一步分选获得高纯度的小胶质细胞；其中，Percoll分离液由70%的Percoll、30%的Percoll和HBSS组成。本发明优化的percoll密度梯度离心法富集小胶质细胞的纯度可达95%以上，且免疫荧光和吞噬实验等也证实其具有良好的功能；本发明的方法具有操作简便易行、成本较低、质量稳定等优点，为进一步研究脑胶质瘤中小胶质细胞的免疫功能及在肿瘤的免疫逃逸中的作用研究提供了基础。

主权项

一种分离纯化小胶质细胞的方法，其特征在于，其包括步骤：步骤一，结合物理分离和酶的消化作用，将离体的新鲜的胶质瘤组织标本制成单细胞悬液；步骤二，采用不同浓度Percoll溶液分离、富集小胶质细胞，并将其与髓磷脂及红细胞碎片分开；步骤三，利用免疫磁珠分选CD11b阳性的细胞，提高小胶质细胞的分离纯度。