[发明专利]一种端粒酶的AETCA检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明提供了一种端粒酶的锚定延伸端粒序列互补扩增（Anchored-Extension and Telomeric Complements Amplification，AETCA）检测试剂盒及检测方法。该试剂盒包括：（1）内部固定有端粒酶引物ATS（SEQ ID No.1）的锚定PCR管；（2）探针BT（SEQ ID No.2）；（3）PCR引物（SEQ ID No.3/4）；（4）裂解缓冲液；（5）延伸杂交缓冲液；（6）PCR缓冲液；（7）洗涤液。本发明以一段与端粒重复序列互补的探针序列（探针BT）为模板，该探针以多拷贝的形式结合在端粒酶合成的端粒重复序列上，这样虽然端粒重复序列的长度不固定，探针BT的扩增仍能保持高效的固定长度，从而克服了TRAP法的缺陷。本方法操作简便易行，可提高端粒酶活性检测的敏感度和特异性，适合对各种来源的包括来源于痰液等临床标本的细胞或组织进行检测。

主权项

一种端粒酶的锚定延伸端粒序列互补扩增检测试剂盒，主要包括：（1）内部固定有端粒酶引物ATS的锚定PCR管；所述端粒酶引物ATS序列为：5’‑ TCCGTCGAGCAGAGTTAGGGTTAG‑3’；（2）探针BT，其核苷酸序列为：5'‑CAGGAGCAGCATTCCATCACGCCCTAACCCTAACCCTAACCCTAACCCTAACCCTAACGTCGCAGGTCCAGAGAAGG‑3’；（3）PCR引物：TAB1:CAGGAGCAGCATTCCATCACG TAB2:CCTTCTCTGGACCTGCGACG；（4）裂解缓冲液； （5）延伸杂交缓冲液；（6）PCR缓冲液；（7）洗涤液。