[发明专利]肺炎支原体耐药菌株的PCR-SNP检测方法有效
申请号: | 201210262158.7 | 申请日: | 2012-07-26 |
公开(公告)号: | CN102747166A | 公开(公告)日: | 2012-10-24 |
发明(设计)人: | 孙红妹;李少丽;薛冠华;赵汉青;冯燕玲 | 申请(专利权)人: | 首都儿科研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12R1/35 |
代理公司: | 北京中伟智信专利商标代理事务所 11325 | 代理人: | 张岱 |
地址: | 100020*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明根据已知的Mp23S rRNA中的耐药突变基因位点设计3条引物对其进行特异性扩增,为增加引物的特异性,人为在特异性引物的3′端引入一个错配碱基且3′端末端落在突变位点上;利用上述引物及其它PCR组份构建PCR反应体系;提取待测样本DNA,加入上述PCR反应体系并进行扩增,将上述扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,判定是否发生耐药基因突变。 | ||
搜索关键词: | 肺炎 支原体 耐药 菌株 pcr snp 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种肺炎支原体耐药菌株的PCR‑SNP检测方法,其特征在于具体包括以下步骤:(1)根据已知的Mp23S rRNA中的耐药突变基因位点设计1条上游引物、1条下游引物和1条特异性引物对其进行特异性扩增,特异性引物是人为在引物的3′端引入一个错配碱基且3′端末端落在突变位点;(2)提取待测样本DNA;(3)利用上述3条引物、样本DNA及其它PCR组份构建PCR反应体系并进行扩增;(4)对上述PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,判定是否发生耐药基因突变。
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