[发明专利]一种黄连木开花基因的克隆及其应用

摘要

本发明公开了一种黄连木开花基因PcBLFY，本发明还公开了一种黄连木开花基因的克隆，根据其它植物已知LEAFY基因序列，设计兼并引物，以黄连木雄株、雌株和雌雄同株总RNA为模板，采用RT-PCR方法合成cDNA第一条链，5’RACE和3’RACE方法克隆PcBLFY的cDNA全长序列。根据获得的cDNA序列设计引物，通过RT-PCR的方法从黄连木雄株、雌株、雌雄同株植株中分别获得2个、1个、2个序列存在单碱基位点多态性差异的LEAFY基因。本发明公开的内容可供创造早开花结果的转基因育种使用。本发明的重要应用前景是用于黄连木不同性别植株的苗期性别鉴定，用于调节黄连木能源林的植株性别比例，从而大幅提高产量。

主权项

一种黄连木开花基因PcBLFY，其特征在于，其具有如下cDNA核苷酸序列：0001 CAAGTGTCAAGTTTCAAACAAACAAAACATCATCAACTCCCCTTTCACTT0051 CTTTAGTTACCCAATCATAAAACAATTAAAACCAGTGACTTAAAGGGCAG0101 TTTTGTGAACCCAAAAACAGTTTGCCTTTATAACAAAGCAACACCAACAC0151 ACAGCTCAAAATYTCAGTTGCTCAGAGAGATGGATCCTGAAGCATTCACG0201 GCGAGCTTGTTTAAGTGGGACCCGCGTGGGSTGGTGCCGCCACAGACCAG0251 GGTGCTGGAACCGGTGGTGCCACTACCGGCAGCGATTTCCGCGGCCACCG0301 CCTTCTCGGTGGTGCGTCCAAGGGAGCTAGGTGGGCTGGAGGAGTTGTTC0351 CAGGCTTATGGGATAAGGTACTACACGGCAGCGAAGATAGCGGAGCTTGG0401 GTTCACGGTGAATACACTTGTGAATATGAAAGATGAGGAGCTTGATGAGA0451 TGATGAACAGCCTGTCTCAGATATTTAGGTGGGAACTCCTTGTTGGAGAG0501 AGGTATGGTATTAAAGCTGCTGTTAGAGCTGAGAGGAGAAGGCTTGATGA0551 GGAGGATTCACGAAGGCGTCACWTACTGTCTGGTGATACTACCAACTCTG0601 TTGATGCTTTGTCCCAAGAAGGGTTATCTGAGGAACCAGTGCAGCAAGAG0651 AAGGAGGCAGCAGGGAGCGGAGGAGGAGGAACGTGGGACTTAGCGGTGGC0701 AGTGACGGAGAGGAAGAAACAGCGGCGGAGGAAGGGGCAAAGGAAGATAG0751 TGGATGTTAATCACTATGATGAAAATGAAGAYGATGAGAATGCTGAAGGC0801 AGTGAGAGACAACGAGAGCACCCCTTCATAGTGACGGAGCCTGGTGAAGT0851 GGCACGTGGCAAAAAAAACGGCCTTGATTACCTGTTCCATCTCTATGAGC0901 AATGCCGTGATTTCTTGATCCAGGTCCAGAACATCGCCAAGGAGCGTGGC0951 GAAAAATGCCCAACCAAGGTGACAAATCAGGTGTTTAGGTATGCAAAGAA1001 GGCTGGTGCAAGCTACATTAACAAGCCAAAGATGAGACACTATGTGCACT1051 GCTATGCGTTGCACTGCCTGGACGAGGAGGCATCAGATGCACTGAGGAGG1101 GTTTTCAAGGAAAGAGGAGAGAACGTGGGGGCTTGGAGACAGGCTTGTTA1151 TAAGCCACTTGTGGGCATTGCAGCACGGCAAGGCTGGGATATTGATGCCA1201 TTTTCAATGCGCATCCTCGTCTGGCCATTTGGTATGTGCCCACGAAGCTG1251 CGTCAACTTTGTCATGCTGAGCGCAATAGTGTCRCTGCTTCTAGCTCTGT1301 GTCTGGCGGGGCTGATCAGCTGCCTTTCTAAATTAAAGCCTCACTGAATG1351 ACCGATTTGCCTAGTGATTAATCCTATTTATGGTGTCTGTTAGCAGTGTT1401 TATTCGTGAATGTTTGTAATCTCACTTCATTTAGACTTATAGCAACTAAT1451 TAATCACARTATTATCACATCAATCGTACGTGTTCTTTAATATTTCTTTT1501 ATCTTATTTGATTTATTATCCATAAAACATTTCCGTAGAAAAAAAAAAAA1551 AAAAAAAAAAAAAAAAAAAA其中，R：A 或G； Y:C或T； S:G或C； W:A或T以黑体显示。