[发明专利]一种金标银染定量检测汞离子的方法及其试剂盒

摘要

本发明公开了一种金标银染定量检测汞离子的方法及其试剂盒，特点是包括将载玻片加热清洗干燥，浸入APTES溶液中，于室温下硅烷化处理再用乙醇洗净后，于110-130℃真空干燥1-3h后得到硅烷化载玻片的步骤；将DNA和纳米金溶液混合，振荡摇匀，室温下温育加水稀释得到特异性DNA-纳米金探针溶液的步骤；将特异性DNA-纳米金探针溶液与样品溶液混合后，滴在硅烷化载玻片上室温至试样点完全干燥后，滴银染试剂暗箱静置后，立即用蒸馏水冲洗再干燥的步骤；最后进行金标银染信号的定量分析，计算得到待测样品溶液中汞离子的准确浓度的步骤。优点是具有高灵敏度、高选择性且可定量分析汞离子浓度，不仅操作简单而且可现场检测。

主权项

一种金标银染定量检测汞离子的方法，其特征在于具体包括以下步骤：（1）硅烷化载玻片的制备将载玻片置于piranha洗液中，90‑100℃加热20‑40 min后取出，用蒸馏水洗涤三次，置于N2氛中干燥后，浸入1‑3wt% 的3‑氨丙基三乙氧基硅烷（APTES）溶液中，于室温下硅烷化处理2‑6h，再用乙醇洗净后，于110‑130℃真空干燥1‑3h后，得到硅烷化载玻片，所述的piranha洗液为98%的浓硫酸和30%双氧水按体积比7：3的比例混合得到；（2）特异性DNA‑纳米金探针溶液的制备将30‑40ul的100 uM序列为HS‑5’‑TTTTTTTTTT‑3’的DNA和0.5‑1.5 mL浓度为20‑25 nM的纳米金溶液混合，振荡摇匀，室温下温育12‑20小时后，加蒸馏水稀释50‑100倍，即得特异性DNA‑纳米金探针溶液；（3）探针与样品反应及银染放大将步骤（2）所得的特异性DNA‑纳米金探针溶液与样品溶液按体积比1‑3：2‑6混合，振荡摇匀10‑20 min后，取2‑4 uL滴在硅烷化载玻片上室温至试样点完全干燥后，在试样点上滴银染试剂4‑6 uL，室温下暗箱静置10‑20 min后，立即用蒸馏水冲去多余银染试剂，然后干燥载玻片；（4）金标银染信号的定量分析将载玻片上的金标银染信号扫描成图片获得待测样品溶液的金标银染信号及其灰度平均值，根据金标银染信号灰度平均值与汞离子溶液浓度之间的定量关系，计算得到待测样品溶液中汞离子的准确浓度。