[发明专利]一株组成型表达精氨酸酶的基因工程菌株及其应用无效
| 申请号： | 201210177959.3 | 申请日： | 2012-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN102703370A | 公开（公告）日： | 2012-10-03 |
| 发明（设计）人： | 张奇;杨洁;李鸣;白芳;白钢 | 申请（专利权）人： | 南开大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P13/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 天津佳盟知识产权代理有限公司 12002 | 代理人： | 侯力 |
| 地址： | 300071*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 一株组成型表达精氨酸酶的基因工程菌株及其应用。通过自杀质粒pRE112构建组成型表达精氨酸酶的基因工程菌菌株E.coliDH5α-ARG，其筛选后获得的高活性菌株酶活力为873U/g，该菌株与实验室保存的诱导型表达的菌株相比，酶活力没有显著性差异。优化的最佳催化反应条件为：反应温度，60℃；pH9.0；Mn2+浓度，0.5mM。最适反应条件下，以2g/L细胞为酶源，当底物L-精氨酸浓度为100g/L时，反应12h，底物L-精氨酸的转化率为98.17%。利用该酶源在该条件下转化10gL-精氨酸可制备L-鸟氨酸7.48g，纯度为98.9%，拆分20gDL-精氨酸可制备L-鸟氨酸7.44g和D-精氨酸9.71g，二者纯度均达98.1%以上。 | ||
| 搜索关键词： | 组成 表达 精氨酸 基因工程 菌株 及其 应用 | ||
【主权项】：
一株组成型表达精氨酸酶的基因工程菌株，其特征在于该菌株是在能够诱导表达精氨酸酶的重组表达载体pET21a(+)‑ARG基础上，通过自杀质粒pRE112，构建重组载体pRE112‑ARG，将其转化至不能表达π蛋白的宿主细胞E.coli DH5α，并通过氯霉素（Cm）抗性筛选，获得的组成型表达精氨酸酶的基因工程菌株E.coli DH5α‑ARG。
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