[发明专利]混合微生物核酸的提取方法有效

专利信息
申请号: 201210162347.7 申请日: 2012-05-23
公开(公告)号: CN102796726A 公开(公告)日: 2012-11-28
发明(设计)人: 张岩;孙义民;杨萍;张亮 申请(专利权)人: 博奥生物有限公司;清华大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/445;C12R1/93;C12R1/35
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅
地址: 102206 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种混合微生物核酸的提取方法。本发明提供的裂解混合微生物样本的试剂,由提取液A和提取液B组成。本发明的实验证明,本发明提供了一种混合微生物核酸的提取方法,能够同时从病毒、革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌、支原体和衣原体混合样品中提取核酸,其主要特定是操作简单,成本非常低,提取效果好,已经优于目前被广泛使用的市售试剂盒。
搜索关键词: 混合 微生物 核酸 提取 方法
【主权项】:
一种裂解混合微生物的试剂,由提取液A和提取液B组成;所述提取液A按照如下方法制备:将Tris、EDTA、SDS、Tween 80、Triton X‑100、Brij 58、3‑[(3‑胆固醇氨丙基)二甲基氨基]‑1‑丙磺酸、十二烷基肌氨酸钠、β‑巯基乙醇和水混合,得到提取液A,所述Tris在所述提取液A中的浓度为5‑20mM;所述EDTA在所述提取液A中的浓度为5‑20mM;所述SDS、所述Tween 80、所述Triton X‑100、所述Brij 58、所述3‑[(3‑胆固醇氨丙基)二甲基氨基]‑1‑丙磺酸、所述十二烷基肌氨酸钠在所述提取液A中的浓度均为0.05%‑0.2%(体积百分含量);所述β‑巯基乙醇在所述提取液A中的浓度为0.1‑0.5%(体积百分含量);所述提取液B按照如下方法制备:将水饱和酚、乙醇、吡咯烷酮混合,得到提取液B,所述水饱和酚、所述乙醇、所述吡咯烷酮的体积比为(99‑98):1:1。
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