[发明专利]一种鉴别鸭瘟病毒强毒与疫苗毒的PCR检测方法

摘要

本发明公开了一种鉴别鸭瘟病毒强毒与疫苗毒的PCR检测方法。所述方法为：根据鸭瘟病毒强毒株与弱毒疫苗株UL2基因差异设计特异性的引物序列，提取待测样品的DNA为模板，进行PCR反应；对PCR结果进行分析，若PCR扩增条带为1018bp，则待测样品含有鸭瘟病毒强毒，若PCR扩增条带为490bp，则待测样品含有鸭瘟病毒疫苗弱毒。本发明提供的针对鸭瘟病毒强毒与疫苗弱毒鉴定的检测方法，具有简便、快速、特异、灵敏和经济的优点，结果判断方法简便，适合于科研、临床和基层实验室使用，具有广阔的应用前景。

主权项

一种鉴别鸭瘟病毒强毒与疫苗毒的PCR检测方法，其特征是：具体步骤为：a设计扩增鸭瘟病毒UL2基因的特异性引物，引物序列为：上游引物P1：5’‑ACGAGGGAGACCCAAATGAC‑3’，下游引物P2：5’‑TTTATACTGTTCCACAAGGAAGTTG‑3’；b按常规方法提取样品中的核酸；c.PCR检测，同时设立阴性对照；PCR检测体系具体为：2×傻瓜PCR Mixtrue 12.5μL，P1(20pmol/μL)1ul，P2(20pmol/μL)1ul，模板溶液1μL，最后用超纯水补至25μL；PCR检测体系扩增参数具体为：95℃预变性5min，95℃变性1min，58.3℃退火1min，72℃延伸1min，循环40次，最后72℃延伸10min；d琼脂糖凝胶上电泳，紫外灯照射观察扩增片段的长度，若PCR扩增条带为1018bp，则待测样品含有鸭瘟病毒强毒，若PCR扩增条带为490bp，则待测样品含有鸭瘟病毒弱毒。