[发明专利]垃圾堆肥中苏云金芽孢杆菌菌落的测定方法

摘要

本发明公开了一种垃圾堆肥中苏云金芽孢杆菌菌落的测定方法，它是先计算相同稀释度的平均菌落数，若片状菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘2以代表全平板的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数，选择平均菌落数在30~300之间的，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该样品的微生物菌落总数。实验结果表明：在培养基上形成的菌落为圆形，白色，边缘光滑，不透明，革兰氏染色为阳性，菌体在显微镜下观察呈椭圆形杆状，芽孢为椭圆形，用溴酚蓝和番红染液进行伴胞晶体染色，镜下观察到有红色菌体，无色芽孢以及蓝色伴孢晶体，初步鉴定其为苏云金芽孢杆菌。

主权项

一种垃圾堆肥中苏云金芽孢杆菌菌落的测定方法，其特征在于按如下的步骤进行：（1）将新鲜堆肥样品称取10g，放入加有20粒玻璃珠的90ml无菌水三角瓶中，振荡，使样品中的微生物充分且均匀分布于液体中，用移液枪在三角瓶中取lml母液，加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀，此为l0‑1浓度的稀释溶液，按此方法分别稀释成l0‑2、l0‑3、l0‑4、l0‑5、l0‑6几种浓度的堆肥稀释液；（2）分别用移液枪吸取0.1毫升浓度为l0‑2、l0‑3、l0‑4、l0‑5、l0‑6稀释液，注入到牛肉膏蛋白胨培养基的平板上；（3）用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀涂抹在整个培养基上，使微生物均匀分布，将含有牛肉膏蛋白胨培养基的平板倒置于37℃恒温培养箱中培养1天；（4）用接菌环直接挑起待分离纯化的菌落，接种到事先准备好的平板培养基中，在平板上自左向右轻轻划线，然后将培养皿倒置于恒温培养箱内培养；（5）苏云金芽孢杆菌的菌落计数方法：先计算相同稀释度的平均菌落数，若片状菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘2以代表全平板的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数，选择平均菌落数在30~300之间的，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该样品的微生物菌落总数。