[发明专利]以Nisin作为天然抗性筛选标记的乳酸菌表达质粒的构建无效
| 申请号： | 201210033514.8 | 申请日： | 2012-02-15 |
| 公开（公告）号： | CN102586314A | 公开（公告）日： | 2012-07-18 |
| 发明（设计）人： | 白杨;龙北国;范宏英 | 申请（专利权）人： | 白杨;龙北国;范宏英 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N15/64;C12N15/65 |
| 代理公司： | 广州市南锋专利事务所有限公司 44228 | 代理人： | 刘媖 |
| 地址： | 510515 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种以Nisin作为天然抗性筛选标记的乳酸菌表达质粒的构建，属于生物技术领域。本发明的构建方法是用来自乳酸菌载体pNZ9530的Nisin元件替换乳酸菌质粒pMG36e红霉素抗性基因作为选择标记，通过PCR扩增、基因克隆、合成多克隆位点、加入嗜酸乳杆菌信号肽、消除抗性基因来实现Nisin食品级表达/分泌型载体的构建。本发明是以食品级选择标记取代了抗生素抗性标记载体，所构建的食品级表达/分泌载体为食品级活载体，对人体和环境安全系数高，可广泛应用于疫苗、食品、药品的应用研究，本发明构建方法可实现外源抗原基因的长期稳定表达，获得长期稳定表达目的抗原蛋白，且方法简单、可操作性强。 | ||
| 搜索关键词： | nisin 作为 天然 抗性 筛选 标记 乳酸菌 表达 质粒 构建 | ||
【主权项】：
一种以Nisin作为天然抗性筛选标记的乳酸菌表达质粒的构建，其特征在于：是用来自乳酸菌载体pNZ9530的Nisin元件替换乳酸菌质粒pMG36e红霉素抗性基因作为选择标记，通过PCR扩增、基因克隆、合成多克隆位点MCS、加入嗜酸乳杆菌信号肽Ins、消除抗性基因Emr来实现Nisin食品级表达/分泌型载体PMN‑5的构建。
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