[发明专利]一种短短芽孢杆菌菌株制备羟苯乙酯的方法

摘要

本发明涉及一种短短芽孢杆菌菌株制备羟苯乙酯的方法，先将短短芽孢杆菌菌株FJAT-0809-GLX进行活化，之后依次制备种子液、液体发酵液，接着将液体发酵液进行离心、大孔树脂富集、浓缩以获得短短芽孢杆菌菌株FJAT-0809-GLX的次生代谢产物，然后分离纯化该次生代谢产物以获得羟苯乙酯。本发明的优点在于：提供了一种获得羟苯乙酯的新途径，避免了化工合成羟苯乙酯对环境所造成的污染。

主权项

一种短短芽孢杆菌菌株制备羟苯乙酯的方法，其特征在于：具体包括如下步骤：(1)短短芽孢杆菌菌株FJAT‑0809‑GLX的活化：用接种环将短短芽孢杆菌FJAT‑0809‑GLX划线于菌株培养基上，并于恒温培养箱中培养24h，且培养温度设定为30℃；(2)制备种子液：将步骤(1)所获得的短短芽孢杆菌菌株FJAT‑0809‑GLX的单菌落接种于100mL的种子培养基中，并将其置于恒温振荡摇床中培养24h，温度30℃，转速180rpm；(3)制备液体发酵液：按10％移种量将步骤(2)所获得的种子液转入已消毒灭菌的发酵培养基中培养，温度30℃，转速180rpm，并在培养过程中每隔一段时间取适量的发酵液检测其pH值及孢子数量，当其孢子数达到10×108/mL时则获得所需的液体发酵液；(4)短短芽孢杆菌菌株FJAT‑0809‑GLX次生代谢产物的制备及活性检测：将步骤(3)所获得的短短芽孢杆菌菌株FJAT‑0809‑GLX发酵液置于常温下离心30min，且离心转速为3600rpm，离心结束后取上清液，该上清液经大孔树脂富集，并将富集所得的富集液进行浓缩，浓缩所得物质为短短芽孢杆菌菌株FJAT‑0809‑GLX的次生代谢产物，并采用抑菌圈法检测所得次生代谢产物的活性；(5)羟苯乙酯的分离纯化：将步骤(4)中所获得的具有活性的次生代谢产物经丙酮萃取，接着所得萃取物经浓缩干燥成粉状，之后将该粉状物采用硅胶柱进一步进行分离纯化，该分离纯化后得到的产物即为所述的羟苯乙酯。