[发明专利]一种区分欧洲型或亚洲型舞毒蛾的方法无效
申请号: | 201110458315.7 | 申请日: | 2011-12-31 |
公开(公告)号: | CN102533995A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 安榆林;钱路;徐梅;郑斯竹;杨晓军;朱宏斌;汪潇琳 | 申请(专利权)人: | 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人: | 王荷英 |
地址: | 210001*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种区分欧洲型或亚洲型舞毒蛾的方法,设计了引物对和探针序列,以所述样品总DNA为DNA模板,实时荧光定量PCR完成时,ABI7500实时荧光定量PCR仪显示样品检测结果为AlleleY值时,表明样品406位点碱基为G,即该样品为亚洲型舞毒蛾;当样品检测结果显示为AlleleX值时,表明样品406位点碱基为A,即样品为欧洲型舞毒蛾。检测快速,准确地鉴定欧洲型和亚洲型舞毒蛾,适用于口岸对进口木材的检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 区分 欧洲 亚洲 毒蛾 方法 | ||
【主权项】:
一种区分欧洲型或亚洲型舞毒蛾的方法:(1)提取样品总DNA;(2)以所述样品总DNA为DNA模板,以F和R为引物,MGB1和MGB2为探针,在ABI7500实时荧光定量PCR仪中进行实时荧光定量PCR;以AG序列为亚洲型阳性对照中的DNA模板,以OG序列为欧洲型阳性对照中的DNA模板;阴性对照中以ddH2O替代DNA模板;所述引物F的序列为:GGATGAACTGTTTACCCTCCTCTATCT;所述引物R的序列为:TTGATGAAATACCAGCTAAGTGAAGAGAAAA;所述探针MGB1的序列为:ACAGATCTACCTCTATGAGCA;所述探针MGB2的序列为: AGATCTACCTCCATGAGCA;所述探针MGB1以绿色荧光蛋白作为荧光报告基团, 所述探针MGB2以羧基荧光素作为荧光报告基团;所述AG序列为:ggatgaactgtttaccctcctctatcttctaatattgctcatggaggtagatctgttgatttagctattttttctcttcacttagctggtatttcatcaa;所述OG序列为:ggatgaactgtttaccctcctctatcttctaatattgctcatagaggtagatctgttgatttagctattttttctcttcacttagctggtatttcatcaa;(3)结果分析:实时荧光定量PCR完成时,ABI7500实时荧光定量PCR仪显示样品检测结果为Allele Y值时,表明样品406位点碱基为G,即该样品为亚洲型舞毒蛾;当样品检测结果显示为Allele X 值时,表明样品406位点碱基为A,即样品为欧洲型舞毒蛾。
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