[发明专利]一种组织工程化传导束及其构建方法与应用

摘要

本发明涉及生物医学工程技术领域，目前基因转染和细胞移植治疗房室传导阻滞存在很多问题和困难，综合考虑生物起搏治疗研究的现状，利用传导束细胞和支架材料在体外构建组织工程化的传导束，将之移植到心脏中修复或再建心脏传导通路，应为房室传导阻滞治疗课题的理想解决方案。但目前国内外尚无构建组织工程化传导束的研究报道。本发明目的在于提供一种组织工程化传导束和构建方法，是利用胶原海绵和骨髓间充质干细胞诱导获得的心脏传导细胞构建组织工程化传导束。本发明的组织工程化传导束具有心电传导特性、可用于治疗移植，为治疗心脏房室传导阻滞所致心律失常疾病带来了希望。

主权项

一种组织工程化传导束的构建方法，其特征在于该方法包括如下步骤：A、与心耳肌细胞共培养诱导骨髓间充质干细胞成为心脏传导细胞抽取骨髓接种培养获得骨髓间充质干细胞，取心耳部位组织进行原代培养获得心耳肌细胞，然后利用细胞培养池将心耳肌细胞与骨髓间充质干细胞共培养2天之后，再施加旁分泌因子内皮素‑1和神经调节蛋白‑1，浓度均为1×10‑8M‑1.5×10‑8M，培养时间为6‑7天，诱导骨髓间充质干细胞成为心脏传导细胞；B、利用胶原海绵和诱导获得的心脏传导细胞构建组织工程化传导束将诱导成功的心脏传导细胞制备成细胞悬液，浓度为1×106个/ml‑1.2×106个/ml，采用沉淀法将细胞悬液滴到胶原海绵支架上，不使其溢出为准，种植该细胞到胶原海绵支架上，种植密度为3×105个/cm3‑6×105个/cm3；培养10‑20天，直到细胞支架复合体形成有功能的传导束。