[发明专利]一种烤烟GC/MS指纹图谱的建立方法及应用

摘要

本发明提供一种烤烟GC/MS指纹图谱的建立方法，经过待测液制备、烤烟GC/MS指纹图谱的获得、GC/MS指纹图谱共有峰数据库的建立，对烤烟指纹图谱共有峰数据库进行聚类分析，从而判定烟草品质级别。本发明能客观的反应烤烟的内在品质，取代传统的人工评吸和普通化学测定方法。不仅降低评吸人员的工作强度，还使烟草品质的评价更具科学性，对提高烤烟生产的经济效益具有重要意义。本发明的特征是，针对烤烟的致香成分，采用超纯水体系同时蒸馏萃取方法提取、GC/MS检测，获得基线分离好、特征峰多、峰响应度高的GC/MS指纹图谱。本发明的核心是将建立的烤烟GC/MS指纹图谱及其配套分析技术应用于烤烟品质分级、产地识别和配方打叶中的烟叶质量控制。

主权项

一种烤烟GC/MS指纹图谱的建立方法，其特征在于经过下列步骤：1)待测液制备：在与蒸馏萃取装置一端相连的平底烧瓶中加入烟末，按15～30的液固比v/g加入纯水，再按0.015～0.030的液固比v/g 加入浓度为4µL/mL的丙酸苯乙酯，进行加热；在与蒸馏萃取装置另一端相连的烧瓶中，按2～4的液固比v/g 加入二氯甲烷，并将该烧瓶置于温度为55～60℃的水浴锅上加热，进行蒸馏萃取2.5～3.0h，之后取下烧瓶，并在该烧瓶中按烟末质量的1/2～1/4的量加入无水硫酸钠，密封过夜后，将其放在旋转蒸发仪上使萃取液浓缩至体积为1～2mL，过0.45µm的滤膜，滤液为待测溶液，备用；2）烤烟GC/MS指纹图谱的获得：将步骤1）的待测溶液用GC/MS仪器分析，GC/MS仪器分析条件为：色谱柱：HP‑5MS；载气：He；流速：0.8－1.0 mL/min；进样口温度：200～240℃；检测器温度：220－280℃；分流比：8～15:1；进样量：1～5µl；程序升温：第一分钟从50℃开始，之后以2～4℃/min的升温速度升至180℃， 再以3～6℃/min的升温速度升至270℃；MS条件为电离电压：60－80ev；离子源温度为：180～220℃；传输线温度：230～270℃，使用Wiley7与Mainlib图谱库进行检索，得到烤烟GC/MS指纹图谱；3）GC/MS指纹图谱共有峰数据库的建立：根据图谱库检索的结果，在步骤2）得到的指纹图谱中挑选出60%以上样品共有的峰，建立GC/MS指纹图谱共有峰数据库；4）根据步骤3）建立的GC/MS指纹图谱共有峰数据库，对烤烟指纹图谱共有峰数据库进行聚类分析，判定烟草品质级别。