[发明专利]一种酵母展示型果胶酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法有效
| 申请号： | 201110260334.9 | 申请日： | 2011-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN102321598A | 公开（公告）日： | 2012-01-18 |
| 发明（设计）人： | 阮晖;张延;余璐;徐娟;周陈伟;杜姗姗;杨璐;何国庆 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N9/26 | 分类号： | C12N9/26;C12N9/60;C12N15/81;C07K1/14;C08B37/00;C12P21/06;C12R1/84 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酵母展示型果胶酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型果胶酶加入水中混匀，于35～37℃下酶解反应30～45min，再于30～32℃下利用功率为730～750W的超声波破碎65～70min；本发明还公开了一种提取紫菜蛋白和紫菜多糖的方法，将上述紫菜细胞破碎后的细胞破碎液分离即可；本发明还公开了一种制备紫菜降血压肽的方法，即将分离的紫菜蛋白利用蛋白酶在在36～37℃下酶解反应130～133min即可。本发明的方法利用酵母展示果胶酶对紫菜细胞的细胞壁进行降解并协同超声波处理，高效破碎紫菜细胞，提高紫菜细胞破碎率，增加紫菜多糖、紫菜蛋白和紫菜降血压肽的得率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 酵母 展示 果胶酶 协同 超声波 破碎 紫菜 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种酵母展示型果胶酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型果胶酶加入水中混匀，于35～37℃下酶解反应30～45min，再于30～32℃下利用功率为730～750W的超声波破碎65～70min；所述酵母展示型果胶酶通过如下方法制备：将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144h后离心收集菌体，菌体经冲洗和冷冻干燥制得酵母展示型果胶酶；所述重组质粒由原始载体pPIC9K和依次插入原始载体pPIC9K中MFα1信号肽基因下游的果胶酶基因和毕赤酵母GS115的细胞壁α凝集素基因组成。
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