[发明专利]一种制备胱抑素C配对单克隆抗体的方法有效
| 申请号： | 201110254775.8 | 申请日： | 2011-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN102321176A | 公开（公告）日： | 2012-01-18 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 北京利德曼生化股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/38 | 分类号： | C07K16/38 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100176 北京市大*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及蛋白质工程领域，具体涉及一种制备CysC配对单克隆抗体的方法，包括：将能够产生胱抑素C抗体的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合后，筛选与胱抑素C具有特异性结合的杂交瘤细胞，制备产单克隆抗体的细胞，完成第1次细胞融合，进一步纯化出单抗，选1个单抗标记辣根过氧化物酶；然后实施第2次小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合；在酶标板上完成胱抑素C抗原包被，将第2次细胞融合得到的杂交瘤细胞培养上清加到酶标板孔中，并设空白对照孔，随后将上述辣根过氧化物酶标记的单抗加到酶标板孔中，37℃温育30分钟，每孔加入底物进行显色，用硫酸终止反应后，测量450nm下的吸光值；选取无抑制的孔作为配对单抗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 制备 胱抑素 配对 单克隆抗体 方法 | ||
【主权项】：
一种制备胱抑素C配对单克隆抗体的方法，其特征在于包括以下步骤：将能够产生胱抑素C抗体的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合后，筛选与胱抑素C具有特异性结合的杂交瘤细胞，制备产单克隆抗体的细胞，完成第1次细胞融合，进一步纯化出单抗，选1个单抗标记辣根过氧化物酶；然后实施第2次小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合；在酶标板上完成胱抑素C抗原包被，将第2次细胞融合得到的杂交瘤细胞培养上清加到酶标板孔中，并设空白对照孔，随后将上述辣根过氧化物酶标记的单抗加到酶标板孔中，37℃温育30分钟，每孔加入底物进行显色，用硫酸终止反应后，测量450nm下的吸光值；选取无抑制的孔作为配对单抗。
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