[发明专利]双水相萃取分离纯化α-淀粉酶的方法无效
申请号: | 201110155496.6 | 申请日: | 2011-06-10 |
公开(公告)号: | CN102220300A | 公开(公告)日: | 2011-10-19 |
发明(设计)人: | 葛菁萍;宋刚;凌宏志;董海丽;平文祥 | 申请(专利权)人: | 黑龙江大学 |
主分类号: | C12N9/30 | 分类号: | C12N9/30;C12R1/69 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 何强 |
地址: | 150080 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 双水相萃取分离纯化α-淀粉酶的方法,它涉及一种分离纯化α-淀粉酶的方法。它解决了目前采用硫酸铵盐析法、离心喷雾干燥法等分离淀粉酶的方法存在样品回收率低、分离材料或设备昂贵、样品处理量小、单一方法分离纯度低的问题,以及经硫酸铵盐析法分离方法得到的α-淀粉酶含有较多杂质,效价低,且不能直接应用于食品工业中的缺陷。双水相萃取分离纯化α-淀粉酶的方法:一、制备真菌α-淀粉酶粗酶液;二、配制PEG/(NH4)2SO4双水相;三、萃取;四、纯化。本发明方法用于分离纯化α-淀粉酶。 | ||
搜索关键词: | 双水相 萃取 分离 纯化 淀粉酶 方法 | ||
【主权项】:
双水相萃取分离纯化α‑淀粉酶的方法,其特征在于双水相萃取分离α‑淀粉酶按以下步骤进行:一、制备真菌α‑淀粉酶粗酶液;二、配制PEG/(NH4)2SO4双水相,PEG/(NH4)2SO4双水相按重量百分比由34%的聚乙二醇1500、24%的(NH4)2SO4、20%的NaCl和余量的去离子水组成;三、按真菌α‑淀粉酶粗酶液与PEG/(NH4)2SO4双水相1∶1的重量比均匀混合,再调节pH值为6.5,然后室温静置2min,收集PEG/(NH4)2SO4双水相中的上层液相;四、将收集的PEG/(NH4)2SO4双水相的上层液相与质量浓度为35%的(NH4)2SO4水溶液构成双水相纯化体系,进行反向萃取,取双水相纯化体系的下相液透析浓缩,即得到α‑淀粉酶。
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