[发明专利]饵料用高SOD活性海洋酵母的筛选方法无效
| 申请号： | 201110093079.3 | 申请日： | 2011-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN102220250A | 公开（公告）日： | 2011-10-19 |
| 发明（设计）人： | 关洪斌;王晓兰;王洛洋;纪政;胡宗仁;王璐思 | 申请（专利权）人： | 山东大学威海分校 |
| 主分类号： | C12N1/16 | 分类号： | C12N1/16;A23K1/16;C12R1/645 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 264209 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明所属微生物饵料研究开发技术领域。本发明涉及饵料用高SOD活性海洋酵母的筛选方法。将海洋红酵母菌接种于培养基上(葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g，琼脂20g，链霉素300U/ml，陈海水1000ml，调pH值4.5-5.0，高压灭菌20min，冷却至室温制成固体培养基)，20℃培养；挑取菌种于斜面上28℃活化三代后(每代24h)，挑取两环培养物接种于装有40ml液体培养基的150ml锥形瓶中，28℃摇床扩培24h；将扩培后活化菌种以10％接种量接种至百草枯浓度为0.25mmol/L的装有40ml液体培养基的150ml锥形瓶中28℃、150r/min摇床培养3d，并将培养集中百草枯浓度由0.25mmol/L依次提高至0.3、0.35、0.4、0.45mmol/L，吕氏美蓝染色进行死活鉴定，最终经涂布分离得单菌株；将分离得到的单菌落划线接种至固体斜面培养，分别编号后，-20℃冰箱保藏。本发明可快速高效地定向筛选获得高SOD活性的洋红酵母以作为饵料用于养殖业。 | ||
| 搜索关键词： | 饵料 sod 活性 海洋 酵母 筛选 方法 | ||
【主权项】：
本发明涉及饵料用高SOD活性海洋酵母的筛选，其特征在于其筛选的方法包括以下过程：步骤(一)：菌种：自己分离或向菌种保臧单位及生物技术公司等索要或采购；步骤(二)：培养基：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g，琼脂20g，链霉素300U/mL，陈海水1000ml。调PH值4.5‑5.0，高压灭菌20min。冷却至室温制成固体培养基；步骤(三)：菌种活化和筛选：将海洋红酵母菌接种于培养基上，20℃培养。挑取菌种于斜面上28℃活化三代后(每代24h)，挑取两环培养物接种于装有40mL液体培养基的150mL锥形瓶中，28℃摇床扩培24h；步骤(四)：将扩培后活化菌种以10％接种量接种至百草枯浓度为0.25mmol/L的装有40mL液体培养基的150mL锥形瓶中。28℃、150r/min摇床培养3d；步骤(五)：重复步骤四将培养集中百草枯浓度由0.25mmol/L依次提高至0.3、0.35、0.4，0.45mmol/L，吕氏美蓝染色进行死活鉴定，最终经涂布分离得单菌株；步骤(六)：菌种保藏：将分离得到的单菌落划线接种至固体斜面培养，分别编号后，‑20℃冰箱保臧；
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