[发明专利]一种苹果汁中脂环酸芽孢杆菌PCR快速特异性检测方法无效
| 申请号： | 201110004200.0 | 申请日： | 2011-01-11 |
| 公开（公告）号： | CN102134608A | 公开（公告）日： | 2011-07-27 |
| 发明（设计）人： | 樊明涛;焦凌霞 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人： | 李郑建 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种苹果汁中脂环酸芽孢杆菌PCR快速特异性检测方法，该方法使用微波直接从果汁样品中提取DNA，根据GenBank中提供的AlicyclobacillusacidoterrestrisDSM3922T的鲨烯环化酶（Shc）基因序列设计了一对特异性引物，将模板DNA、引物JLX-F和引物JLX-R构成25ul体系进行PCR扩增，1%琼脂糖凝胶电泳检测在648bp处获得目的条带，即得检测结果。并分别对引物特异性、微波提取DNA的扩增效果及检测灵敏度进行了研究，验证，其检测时间缩短，检测成本降低，能够实现从苹果汁生产的在线检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 苹果汁 中脂环酸 芽孢 杆菌 pcr 快速 特异性 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种苹果汁中脂环酸芽孢杆菌PCR快速特异性检测方法，其特征在于，具体按下列步骤进行：1）取1ml果汁菌悬液，经10000r/min离心2min，弃上清，加50ul双蒸馏水重悬；2）重悬后的菌体经微波1000W处理60s，5000r/min离心1min，取上清，得到模板DNA；3）设计一对SHC引物JLX‑F和JLX‑R，其中：引物JLX‑F：5'‑CGGCACCTGGTCCATTTATC‑3'引物JLX‑R：5'‑TCGAGCCCTTCAAACCCTTT‑3'；4）将模板DNA、引物JLX‑F和引物JLX‑R构成25ul体系进行PCR扩增；5）1%琼脂糖凝胶电泳检测在648bp处获得目的条带，即得检测结果。
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