[发明专利]K88大肠杆菌不同血清型的PCR特异性检测和分型鉴别方法无效
| 申请号： | 201010574869.9 | 申请日： | 2010-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN101979664A | 公开（公告）日： | 2011-02-23 |
| 发明（设计）人： | 朱国强;郁磊;吴圣龙;包文斌;朱春红;羊扬;王建业;姚丰华;朱军;舒燕;朱晓芳 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/10 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及K88大肠杆菌不同血清型的检测方法。该方法是先对待测样本进行PCR特异性检测，出现750bp条带的为待测样本为K88大肠杆菌，再分别用3对特异性引物对K88大肠杆菌DNA进行PCR扩增，根据扩增产物的500bp条带判断血清型。本发明的方法不仅分型结果准确无误，且没有假阳性和相互交叉反应的发生，还具有操作简便，可同时检测多个样品，成本较低的优点。 | ||
| 搜索关键词： | k88 大肠杆菌 不同 血清 pcr 特异性 检测 鉴别方法 | ||
【主权项】：
一种K88大肠杆菌不同血清型的PCR特异性检测和分型鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）K88大肠杆菌PCR特异性检测：以SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的序列为引物，对待测样本DNA模板进行PCR扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，出现750bp 条带的为待测样本为K88大肠杆菌；（2）分型鉴别：以步骤1确定为K88大肠杆菌的待测样本的DNA为模板，分别用下述3对引物进行PCR扩增：第1对：上游引物序列如SEQ ID NO：1，下游引物序列如SEQ ID NO：3；第2对：上游引物序列如SEQ ID NO：1，下游引物序列如SEQ ID NO：4；第3对：上游引物序列如SEQ ID NO：1，下游引物序列如SEQ ID NO：5；扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，根据出现500bp 条带所对应的引物来判断待测样本血清型：由第1对引物扩增出500bp 条带的，待测样本血清型为K88ab；由第2对引物扩增出500bp 条带的，待测样本血清型为K88ac；由第3对引物扩增出500bp 条带的，待测样本血清型为K88ad。
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