[发明专利]肠出血性大肠杆菌O157:H7多色量子点快速检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开了肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7多色量子点快速检测试剂盒，包含以下试剂：①固定在固相载体上的捕获探针，②分别用荧光发射波长互不重叠的量子点标记的rfbE基因探针、HlyAB基因探针和stx2基因探针，③核酸样本的PCR扩增引物A组或B组；还公开了该试剂盒的检测方法：取疑是EHEC O157:H7感染的核酸样本，用PCR扩增引物A组或B组进行PCR扩增，所得PCR产物再与捕获探针和三种量子点标记的检测探针进行杂交，通过每种检测探针所标记量子点的荧光发射波长和强度对相应靶基因进行检测，根据三种靶基因的检测结果可准确、快速地确定样本中是否含有EHEC O157:H7。

主权项

肠出血性大肠杆菌O157：H7多色量子点快速检测试剂盒，其特征在于：包含以下试剂：①固定在固相载体上的捕获探针；②分别用荧光发射波长互不重叠的量子点标记的三种检测探针：O157抗原编码基因rfbE探针、溶血性基因HlyAB探针和志贺毒素基因stx2探针；③核酸样本的PCR扩增引物A组或B组：所述PCR扩增引物A组用于扩增分别包含O157抗原编码基因rfbE片段、溶血性基因HlyAB片段和志贺毒素基因stx2片段中的一种、以及与捕获探针结合片段的PCR产物；所述PCR扩增引物B组用于扩增同时包含O157抗原编码基因rfbE片段、溶血性基因HlyAB片段、志贺毒素基因stx2片段、以及与捕获探针结合片段的PCR产物。