[发明专利]一种HLA基因分型的PCR-SBT方法及其试剂有效
| 申请号： | 201010256435.4 | 申请日： | 2010-08-18 |
| 公开（公告）号： | CN101928776A | 公开（公告）日： | 2010-12-29 |
| 发明（设计）人： | 朱发明;章伟;严力行 | 申请（专利权）人： | 浙江省血液中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 刘晓春 |
| 地址： | 310006 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供一种HLA基因分型的PCR-SBT方法，它对HLA-A位点1-7外显子、HLA-B位点1-7外显子、HLA-C位点1-7外显子进行基因分型，包括以下步骤：(1)、制备人基因组DNA；(2)、设计扩增引物；(3)、将扩增产物进行双酶切纯化；(4)、设计测序引物，将纯化产物进行测序PCR反应；(5)、将测序产物进行醋酸钠-乙醇沉淀法纯化，进行毛细管电泳测序；(6)、将获得的序列通过软件分析，确定其基因型。本发明通过对HLA-A、B、C位点1-7外显子进行全长序列测序，获得HLA-A、B、C位点相关外显子的全长和部分内含子寡核苷酸序列，精确地对其基因型进行分型。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 hla 基因 pcr sbt 方法 及其 试剂 | ||
【主权项】：
一种HLA基因分型的PCR SBT方法，其特征在于它对HLA A位点1 7外显子、HLA B位点1 7外显子、HLA C位点1 7外显子进行基因分型，包括以下步骤：（1）、制备人基因组DNA；（2）、设计扩增引物，用聚合酶链反应分别扩增人基因组DNA中HLA A、HLA C位点基因外显子1 8全长序列和HLA B位点基因外显子1 7全长序列；（3）、将步骤（2）得到的扩增产物进行双酶切纯化；（4）、设计测序引物，将步骤（3）得到的纯化产物进行测序PCR反应；（5）、将步骤（4）得到的测序产物进行醋酸钠 乙醇沉淀法纯化，进行毛细管电泳测序；（6）、将步骤（5）获得的序列通过软件分析，确定其基因型。
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