[发明专利]一种黄牛chemerin基因的单核苷酸多态性检测方法无效
申请号: | 201010255639.6 | 申请日: | 2010-08-18 |
公开(公告)号: | CN101921854A | 公开(公告)日: | 2010-12-22 |
发明(设计)人: | 陈宏;张亚;朱金龙;徐瑶;蓝贤勇;雷初朝 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 712100 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种黄牛chemerin基因单核苷酸多态性的检测方法,其基因多态性包括:在黄牛chemerin基因第868位为A或G的碱基多态性;在黄牛chemerin基因第1021位为G或A的碱基多态性。上述黄牛chemerin基因的单核苷酸多态性为:以包含chemerin基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对(包括P和newP)为引物,PCR扩增黄牛chemerin基因;用限制性内切酶PvuII消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛chemerin基因第868位和第1021位的单核苷酸多态性;该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生产性状密切相关的分子遗传标记,中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS),快速建立遗传资源优良的黄牛种群。 | ||
搜索关键词: | 一种 黄牛 chemerin 基因 核苷酸 多态性 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种黄牛chemerin基因的单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:以包含黄牛chemerin基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增黄牛chemerin基因;所述的引物对P为:正向引物:5’ CGGAGCCCACCAGACAGG 3’18bp;反向引物:5’ CAGCGGGCAGCAGCACAC 3’18bp;将PCR产物送测序,根据测序结果及突变情况,在第1021位之后重新设计下游引物,并人为引入PvuII酶切位点,以引物对newP为引物,PCR扩增黄牛chemerin基因;所述的引物对newP为:上游引物:5’ CGGAGCCCACCAGACAGG 3’ 18bp;下游引物:5’ ctctgggctggcgctcaccgtgtcAgc 3’27bp;用PvuII限制性内切酶消化PCR扩增产物,再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳,根据琼脂糖凝胶电泳结果同时鉴定黄牛的chemerin基因第868位和第1021位的碱基多态性。
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