[发明专利]染色体的无痕迹修饰方法无效
| 申请号： | 201010213287.8 | 申请日： | 2010-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN101892221A | 公开（公告）日： | 2010-11-24 |
| 发明（设计）人： | 王德明 | 申请（专利权）人： | 苏州神洲基因有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N1/21 |
| 代理公司： | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人： | 陈忠辉 |
| 地址： | 215600 江苏省苏州市张家*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种对染色体的无痕迹修饰方法。首先，构建包含阳性筛选标记、反筛选标记、内切核酸酶I-SceI、诱导性启动子、I-SceI识别位点、与靶染色体核酸序列同源的靶核酸置换序列的重组盒；然后，用电转化的方法把上述DNA片段输入包含重组质粒的宿主；接着，通过I-SceI介导的双链断裂修复现象从所希望的重组体中敲除以下基因序列：阳性筛选标记、可诱导启动子、I-Scel基因、反筛选标记，最后在蔗糖培养基上筛选最终重组体。该方法可以对染色体靶基因进行插入、敲除或置换，不会留下任何筛选标记或外源DNA序列，是无痕修饰宿主细胞DNA序列的有效方法。 | ||
| 搜索关键词： | 染色体 痕迹 修饰 方法 | ||
【主权项】：
染色体的无痕迹修饰方法，其特征在于：首先，构建包含阳性筛选标记、反筛选标记、内切核酸酶I‑SceI、诱导性启动子、I‑SceI识别位点、与靶染色体核酸序列同源的靶核酸置换序列的重组盒；然后，用电转化的方法把上述DNA片段输入包含重组质粒的宿主；接着，通过I‑SceI介导的双链断裂修复现象从所希望的重组体中敲除以下基因序列：阳性筛选标记、可诱导启动子、I‑Scel基因、反筛选标记；最后，在蔗糖培养基上筛选最终重组体。
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