[发明专利]平邑甜茶叶盘再生不定芽的培养方法

摘要

本发明公开了一种平邑甜茶叶盘再生不定芽的培养方法，其是将平邑甜茶组培苗先在继代培养基上培养35天，继代培养后取面积0.1cm2的叶盘，接种在再生培养基上；接种后在温度(25±1)℃下暗培养14天，然后置于光周期16小时光照/8小时黑暗、光照强度为30μmol·m-2·s-1的条件下再培养30天，可再生出不定芽。本发明还公开了该培养方法中使用的再生培养基。使用本发明的培养技术，可以使苹果砧木平邑甜茶的叶盘不定芽再生频率达到100％，非常有利于进行平邑甜茶的转基因研究和快速繁殖。

主权项

一种平邑甜茶叶盘再生不定芽的培养方法，其特征在于，步骤如下：A.将平邑甜茶组织培养苗在继代培养基上培养35天，之后在无菌条件下取组织培养苗的伸展叶片，剪成面积0.1cm2的叶盘，接种在再生培养基上；B.接种后，先在温度(25±1)℃条件下暗培养14天，然后置于光周期为16小时光照/8小时黑暗、光照强度为30μmol·m-2·s-1的条件下再培养30天，可再生出不定芽；C.将不定芽切下，接种在生根培养基上，置于光周期为16小时光照/8小时黑暗、光照强度为30μmol·m-2·s-1的条件下培养40天，即可完成生根；所述继代培养基为在MS基本培养基中附加30g·L-1蔗糖、6.5g·L-1琼脂粉、0.3mg·L-16-苄基腺嘌呤和0.1mg·L-1萘乙酸，pH5.6的培养基；所述再生培养基为在MS基本培养基中附加30g·L-1蔗糖、6.5g·L-1琼脂粉、2.0mg·L-1N-苯基-N’-1，2，3-噻二唑-5-脲和0.2mg·L-1吲哚丁酸，pH5.6的培养基；所述生根培养基为在MS基本培养基中附加30g·L-1蔗糖、6.5g·L-1琼脂粉和0.4mg·L-1吲哚丁酸，pH5.6的培养基。