[发明专利]鸡同源特异性血清和免疫球蛋白的制备与应用

摘要

本发明公开了一种鸡同源特异性血清和免疫球蛋白的制备与应用特异性血清的制备，其技术方案为：免疫原的制备；特异性血清制备；免疫球蛋白的制备；病毒灭活、活性检测。本发明利用肉食鸡免疫方法生产特异性血清和免疫球蛋白制成被动免疫制剂，使用后可使肉食鸡立即获得免疫保护能力，具有疗效显著、药效作用迅速、无毒副作用的特点，药物制剂容易保存，便于运输，保质期长，生产工艺简单，适合于工业化生产。

主权项

1.鸡同源特异性血清和免疫球蛋白的制备与应用，其特征在于：(1)特异性血清的制备1)、免疫原的制备：用国家标准病原体毒株接种易感鸡胚胎，收获感染胚液，经提纯、浓缩、灭活，加MAC进口佐剂乳化而成制得免疫原，然后按程序单一或联合免疫健康肉食鸡而获得特异性血清；2)、肉食鸡免疫：皮下多点注射上述制备的特定免疫原(疫苗)，每鸡0.5ml；3)、肉食鸡免疫程序：4)、特异性血清制备：肉食鸡屠宰后取血、加入浓度为109mmol/l的枸橼酸钠作为抗凝剂、分离血清、冷藏在0℃-10℃的环境中；(2)、免疫球蛋白的制备由特异性血清中，经膜分离或放入10％-100％的饱和硫酸铵盐析等常规制备工艺，提取特异性免疫球蛋白；(3)、病毒灭活为避免病原体的垂直感染，以上制备的特异性血清和免疫球蛋白要经过病毒灭活；将制备物(血清或球蛋白)置50-60℃水浴中温育10小时灭活可能存在的病毒；经检测，经过上述灭活处理的制备物主要病原体检测均为阴性；(4)、活性检测ELISA间接试验，操作方法参照常规ELISA间接法，所用抗原、酶标抗体均按棋盘滴定法确定工作浓度；抗原浓度为100μg/ml，被测制备物每孔加样100μl，辣根过氧化物酶标抗兔抗鸡IgG工作稀释浓度为1∶10000，底物为OPD，2ml/浓硫酸终止反应，酶标仪492nm下测定OD值。经制备物体外琼脂扩散抗体效价在1∶64以上，红细胞凝集抑制试验抗体效价1∶320-1∶1084。