[发明专利]一种筛选抗酚发根农杆菌菌株的方法无效
| 申请号： | 201010119962.0 | 申请日： | 2010-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN101768623A | 公开（公告）日： | 2010-07-07 |
| 发明（设计）人： | 毛清黎;刘仲华;李玲;施兆鹏;朱旗;杨新河 | 申请（专利权）人： | 孝感学院 |
| 主分类号： | C12Q1/04 | 分类号： | C12Q1/04 |
| 代理公司： | 武汉天力专利事务所 42208 | 代理人： | 程祥;冯卫平 |
| 地址： | 432000湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 一种筛选抗酚发根农杆菌菌株的方法。将发根农杆菌菌株转接到含卡那霉素的YEB液体培养基进行菌种活化，然后将活化菌液涂布在含有茶多酚和卡那霉素的AB固体培养基上进行抑菌培养，挑取在200μg/ml茶多酚浓度下仍能生长的单菌落，再转接到含200μg/ml浓度茶多酚的含卡那霉素的AB液体培养基进行菌种活化，然后将活化的菌液分别涂布到含不同浓度的茶多酚的培养基的平板进行再次抗酚筛选和活化培养，直至获得在800-1000μg/ml浓度茶多酚培养基仍然能生长形成菌落的抗酚性强的发根农杆菌菌株。本发明通过抗酚筛选获得抗酚性强的菌株，使之在介导茶树等富含多酚类的植物时仍具有相当高的活性，获得的抗酚性强的菌株可提高茶树的发根诱导频率及发根密度2-3倍。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 筛选 发根 杆菌 菌株 方法 | ||
【主权项】：
一种筛选抗酚发根农杆菌菌株的方法，将发根农杆菌菌株(Agrobacterium rhizogenes)转接到含卡那霉素的YEB液体培养基进行菌种活化，然后将此活化菌液100μl涂布在含有茶多酚浓度为25-800μg/ml以及含卡那霉素的AB固体培养基上进行抑菌培养24-48小时，挑取在200μg/ml茶多酚浓度下仍能生长的单菌落，再转接到含200μg/ml浓度茶多酚的含卡那霉素的AB液体培养基进行菌种活化，然后将活化的菌液100μl分别涂布到含200、400、800和1000μg/ml浓度的茶多酚的含卡那霉素的AB液体培养基的平板进行再次抗酚筛选和活化培养，依此进行2-3次抗酚筛选直至获得在800-1000μg/ml浓度茶多酚培养基仍然能生长形成菌落的抗酚性强的发根农杆菌菌株。
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